O pré-tratamento da biomassa lignocelulósica tem a função de alterar as interações nativas entre a celulose, a hemicelulose e a lignina e, em muitos casos, modificar quimicamente estes componentes da biomassa, de forma a tornar a celulose mais acessível à etapa de hidrólise enzimática. O presente trabalho tem por objetivo avaliar o desempenho do pré-tratamento da palha de cana de açúcar em solventes eutéticos para hidrólise enzimática. A realização de pré-tratamento preliminares em escala reduzida indicou que o solvente eutético Cloreto de Colina/Uréia apresentou os melhores rendimentos de solubilização de lignina e celulose. Esse solvente foi então escolhido para a realização de pré-tratamento em escala ampliada. A composição da palha in natura e pré-tratada em escala ampliada foram então submetidas a caracterização ácida e constatou-se uma remoção de 40,2% de lignina da composição da biomassa, indicando que o pré-tratamento foi bem sucedido. Contudo, os resultados da hidrólise enzimática da biomassa pré-tratada, utilizando a enzima industrial Celluclast 1.5L, apresentaram rendimentos de glicose de 13%, 17% e 19% para cargas enzimáticas de 10 FPU, 15 FPU E 20 FPU respectivamente. O baixo rendimento de hidrólise, apesar da constatada remoção de lignina, indica um possível erro na condução do experimento de hidrólise ou uma deficiência do solvente eutético na redução do grau de cristalinidade do complexo celulósico.