Trabalho de conclusão de graduação
O estudo do papel das redes extracelulares de neutrófilo na infecção por Leishmania
Registro en:
SANTOS, L. L. (2021). O estudo do papel das redes extracelulares de neutrófilo na infecção por Leishmania [Trabalho de Conclusão de Curso, Universidade Federal do Rio de Janeiro]. Repositório Institucional Pantheon.
Autor
Santos, Letícia Leonardo
Institución
Resumen
Os neutrófilos são células fagocíticas e possuem diversos mecanismos efetores, como a liberação das redes extracelulares de neutrófilos (NETs). Essas células constituem a primeira linha de defesa do organismo contra patógenos. As NETs são compostas pela cromatina descondensada, associada a proteínas de diversos compartimentos celulares e funcionam na contenção e morte dos microrganismos. Nosso grupo demonstrou que a liberação dessas redes pode ser induzida na infecção por Leishmania e que as NETs prendem e matam o parasito. Contudo, o papel das NETs em modular as respostas de outras células fagocíticas, importantes
na leishmaniose, foi pouco abordado. Os monócitos são células fagocíticas recrutadas logo após a primeira onda de recrutamento de neutrófilos para a derme do hospedeiro infectado com Leishmania e são importantes para o estabelecimento da infecção. Nosso trabalho tem como objetivo avaliar os efeitos das redes extracelulares de neutrófilos nos monócitos infectados por Leishmania major, e se essa interação é capaz de alterar a sobrevivência dos parasitos nos monócitos. Os neutrófilos e monócitos humanos foram isolados do sangue periférico de doadores saudáveis e usados nos experimentos reportados aqui. As NETs foram
produzidas por ativação dos neutrófilos com promastigotas de Leishmania. As redes foram quantificadas no sobrenadante através da dosagem de DNA. Para o ensaio de sobrevivência os monócitos foram infectados com promastigotas de Leishmania major, tratados ou não com NETs e, após 48 horas, lisados para a contagem dos parasitos viáveis. O mesmo ensaio de sobrevivência foi realizado com monócitos infectados tratados com elastase neutrofílica.Nossos resultados mostram que as redes extracelulares de neutrófilos, ao interagirem com os monócitos infectados com L.major, são capazes de aumentar a sobrevivência do parasito. O bloqueio da endocitose das NETs, causado pela administração de citocalasina D, inibiu o efeito das redes, reduzindo a sobrevivência do parasito. Da mesma forma, a adição de elastase aumenta a sobrevivência de L. major nos monócitos. Este efeito não foi observado na infecção por L. amazonensis. Na tentativa de estabelecer um mecanismo que explique nossos resultados, tentamos quantificar a produção das espécies reativas de oxigênio (ROS) na cultura de monócitos infectados, tratados ou não com elastase. Não observamos diferenças na produção de ROS entre os grupos. Evidenciamos aqui um aspecto interessante da interação entre os neutrófilos e monócitos na infecção por Leishmania major e experimentos futuros serão direcionados para entender os mecanismos envolvidos no aumento da infecção causado pelas NETs.