Dissertation
Avaliação inicial de atividades imunomoduladoras de extratos de peles e glândulas parotóides de anuros do semi-árido brasileiro
Initial evaluation of immunomodulatory activity of skin and parotoids glands extracts of anure of the brazilian semi-arid
Registro en:
SÁ, Matheus Santos de. Avaliação inicial de atividades imunomoduladoras de extratos de peles e glândulas parotóides de anuros do semi-árido brasileiro. 2005. 82 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2005.
Autor
Sá, Matheus Santos de
Resumen
[INTRODUÇÃO] A pele dos anfíbios exibe um verdadeiro arsenal de compostos químicos naturais, com diversificadas atividades biológicas. Esses compostos fazem parte de um complexo sistema de defesa passiva dos anfíbios contra substâncias prejudiciais com as quais eles têm contato nos seus habitats. O semi-árido brasileiro abrange cerca de aproximadamente 11,5 por cento do território nacional, incluindo oito estados da região nordeste e dois da sudeste. O objetivo do trabalho foi investigar a atividade imunomoduladora dos extratos preparados de peles (EP) e glândulas (EG) de espécies de anuros nativos ou endêmicos da região do semi-árido brasileiro. [MÉTODOS] Extratos aquosos foram obtidos a partir da homogeneização da pele dos anuros. (espécies Hyla crepitans, Hyla albopunctata, Hyla spn, Leptodactylus ocellatus, Bufo rubescens, Ceratophrys joazeirensis, Hyla spn2 e Bufo Jimi) em PSB. Para a avaliação da inibição da produção de NO, nós utilizamos células da linhagem J774 (monócitos) que foram cultivadas na presença de IFN y, LPS e os extratos (EP e EG). Visando a avaliação da possível capacidade dos extratos em modularem a atividade de macrófagos na produção de NO e de interferir na proliferação de linfócitos, realizamos dosagem de nitrito através do método de Griess e o cultivo de esplenócitos de camundongos BALB/c estimulados com concanavalina A na presença dos extratos de anuros em concentrações atoxas, respectivamente. A inibição da linfoproliferação foi determinada pela incorporação de 3H-timidina. [RESULTADOS] Dos oito extratos analisados, três tiveram atividade inibitória superior a 50 por cento da proliferação de esplenócitos estimulados e apenas um extrato na inibição da produção de NO. Um desses extratos (preparado a partir da pele de Bufo rubescens) apresentou atividade inibitória de 100 por cento. Identificamos uma molécula ativa neste extrato, com atividade supressora, que é termo-estável e está presente numa fração de peso molecular menor que 10kDa. [CONCLUSÃO] Nosso trabalho demonstra que espécies de anuros são uma potencial fonte de moléculas com atividade imunomoduladora. Estudos para isolar e caracterizar a molécula ativa da pele de Bufo rubescens estão sendo realizados [INTRODUCTION] The skin of the amphibians shows several natural chemical products, with diverse biological activities. These compounds are part of a complex system of passive defense of amphibians against pathogens and harmful substances to they are exposed in their habitats. The brazilian semi-arid region comprises 11,5% of the national territory, including eight states of the northeastern and two from the southeast region of the country. The objective of this work was to investigate the immunomodulatory activity of skin (SE) and gland (GE) extracts prepared from species of anures native or endemic of the brazilian semi-arid
region. [METHODS]: Aqueous extracts were prepared by homogenization of the anure skins (species Hyla crepitans, Hyla albopunctata, Hyla spn, Leptodactylus ocellatus, Bufo rubescens, Ceratophrys joazeirensis, Hyla spn2 and Bufo jimi) in PBS. To evaluate the inhibition of nitric oxide (NO) production, we used J774 cells (monocyte) that were cultivated in the presence of IFN- and LPS and the extracts. Aiming at the evaluation of the possible capacity of the extracts in modulating the macrophages activity in the NO production and to intervene with the lymphocytes
proliferation, we carry through assessment of nitrite concentration through the Griess method and the culture of spleen cells from BALB/c mice stimulated with concanavalin A in the presence of anure extracts in non-toxic concentrations, respectively. The lymphoproliferative response was determined by measurement of 3H-timidine incorporation. [RESULTS] Of the eight extracts analyzed, three had inhibitory activity superior to 50% in lymphoproliferation and only one extract in NO production. One of these extracts (prepared from Bufo rubescens skin) had an inhibitory activity of 100%. We identified an active molecule in this extract with immune suppressive activity, which is heat-stable and is present in a fraction of
molecular weight below 10 kDa. [CONCLUSION] Our work demonstrates that anure species are a potential source of molecules with immunomodulatory activity. Studies to isolate and characterize the activity molecule in the skin of Bufo rubescens are being carried out.