A leishmaniose visceral americana (LVA) no Brasil é causada pelo protozoário Leishmania (Leishmania) chagasi. O principal vetor do parasito é o flebotomíneo Lutzomyia longipalpis, e o reservatório nos ambientes domiciliar e peridomiciliar é o cão, e ambos contribuem para a manutenção do ciclo da doença. Para o diagnóstico da leishmaniose deve ser considerada a associação entre dados clínicos, laboratoriais e epidemiológicos. A leishmaniose visceral canina (LVC) apresenta-se clinicamente de maneiras variadas. O diagnóstico laboratorial inclui métodos parasitológicos com identificação microscópica direta e isolamento do parasita, métodos moleculares, e testes sorológicos como a imunofluorescência indireta (IFI), o ensaio imunoenzimático (ELISA) e o teste imunocromatográfico rápido (DPP). Para o diagnóstico laboratorial da LVC, o Ministério da Saúde preconiza a técnica de ELISA para triagem e a IFI para a confirmação dos casos. O presente estudo teve como objetivo reavaliar a prevalência da LVC em 2012 e identificar a fauna flebotomínica, na Ilha da Marambaia, município de Mangaratiba, Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Para a avaliação sorológica foram empregadas as técnicas IFI, ELISA e DPP. Para levantamento da fauna flebotomínica foram realizadas capturas por armadilhas tipo HP. O censo canino totalizou 116 cães, sendo identificados 17 cães positivos, uma prevalência de 14,65%. Um total de 2.524 espécimes foram capturados no período de abril a novembro de 2012. Foram encontradas nove espécies de flebotomíneos: Lutzomyia longipalpis, Nyssomyia intermédia, Migoneimyia migonei, Pintomyia fischeri, Evandromyia edwardsi, Micropygomyia capixaba, Pintomyia bianchigalatiae, Micropygomyia schreiberi e Bruptomyia sp.. A confirmação de 17 (14,65%) cães soropositivos para LVC na Ilha da Marambaia no ano 2012, ao compararmos com a prevalência encontrada em 2009 que foi de 15%, demonstra a manutenção da prevalência da infecção na região, mesmo com a remoção de grande parte dos cães sororreatores diagnosticados em 2009. Na avaliação da fauna flebotomínica foi encontrada uma baixa densidade de L. longipalpis na região, o que pode explicar o não encontro de casos humanos de LV. Os resultados nos mostraram que a prevalência da LVC não foi alterada.American visceral leishmaniasis (AVL) in Brazil is caused by Leishmania (Leishmania) chagasi. The main vector of the parasite is the sandfly Lutzomyia longipalpis, and the reservoir in the domiciliary area is the dog, and both contribute to the maintenance of the disease cycle. For the diagnosis of leishmaniasis should be considered the association between clinical, laboratory and epidemiological studies. Canine visceral leishmaniasis (CVL) presents clinically in various ways. Laboratory diagnosis includes parasitological methods with direct microscopic identification and isolation of the parasite, molecular methods, such as serological tests and indirect immunofluorescence (IFI), the immunoenzymatic assay (ELISA) and immunochromatographic test (DPP). For laboratory diagnosis of CVL, the Ministry of Health recommends the ELISA technique for screening and confirmation for IFI cases. The present study aimed to assess the prevalence of LVC in 2012 and identify sand flies in Marambaia Island, the city of Mangaratiba, State of Rio de Janeiro, Brazil. To evaluate serological techniques were employed IFA, ELISA and DPP. For survey of sand flies were captured by HP light traps. The canine census totaled 116 dogs, 17 dogs being identified positive, a prevalence of 14.65%. A total of 2.524 specimens were collected from April to November 2012. Foram found nine species of sandfly: Lutzomyia longipalpis, Nyssomyia intermediate Migoneimyia migonei, Pintomyia fischeri, Evandromyia edwardsi, Micropygomyia capixaba, Pintomyia bianchigalatiae, Micropygomyia schreiberi and Bruptomyia sp.. The confirmation of 17 (14,65%) seropositive dogs for LVC in Marambaia Island in the year 2012, when compared with the prevalence found in 2009 that was 15%, demonstrating the maintenance of the prevalence of infection in the region, even with the removal of most dogs seropositive diagnosed in 2009. In the evaluation of sand flies found a low density of L. longipalpis in the region, which may explain the finding of no human cases of VL. The results showed that the prevalence of CVL has not changed.