INTRODUÇÃO: O vírus da Zika (ZIKV), um membro pertencente ao gênero Flavivirus e à família Flaviviridae, chamou a atenção da população com sua rápida expansão geográfica e o aumento da patogenicidade, incluindo Síndrome de Guillain- Barré e microcefalia. Até o momento, não existe nenhuma vacina aprovada ou terapia específica para prevenir ou tratar a infecção por ZIKV. Dadas as complicações da infecção por ZIKV e os potenciais danos à saúde pública, opções de tratamento efetivas, incluindo vacinas e intervenções farmacológicas, têm se tornado o foco de Universidades e indústrias em todo o mundo. OBJETIVO: Realizar ensaio para triagem e identificação de drogas contra a neurotoxicidade causada pelo ZIKV em células progenitoras neurais (NPCs) humanas. METODOLOGIA: A triagem de drogas consistiu na avaliação do potencial antiviral de cloroquina, fingolimod (FTY720), mefloquina, tenofovir, N,N-dimetilesfingosina (DMS), azidotimidina (AZT) e ácido betulínico, em 3 linhagens celulares, que incluíram células HepG2, fibroblastos dermais e NPCs humanos em uma plataforma de triagem de alto conteúdo. RESULTADOS: NPCs derivadas de células-tronco humanas de pluripotência induzida (iPSCs) foram geradas e caracterizadas com sucesso para testes de drogas in vitro. Todas as drogas avaliadas não apresentaram efeito antiviral satisfatório para a infecção com ZIKV, nem em HepG2 nem em fibroblastos, com exceção do ácido betulínico, que, embora tenha indicado modesto efeito antiviral em NPCs, acarretou menos morte celular após a infecção viral nesta linhagem. CONCLUSÃO: Este ensaio baseado na utilização de NPCs derivadas de iPSCs produziu resultados consistentes para a triagem de drogas quanto à avaliação de neurotoxicidade. Além disso, o ácido betulínico evidenciou um efeito citoprotetor em NPCs infectadas por ZIKV, as quais são muito suscetíveis aos efeitos da infecção viral.INTRODUCTION: Zika virus (ZIKV), a member of the genus Flavivirus and the Flaviviridae family, has drawn the population's attention with its rapid geographic expansion and increased pathogenicity, including Guillain-Barré syndrome and microcephaly. To date, there is no approved vaccine or therapy to prevent or treat ZIKV infection. Due to ZIKV infection complications and potential threat to public health, effective treatment options, including vaccines and pharmacological interventions, became the aims of Universities and industries around the world. OBJECTIVE: To perform an assay for drug screening to identify agents against ZIKV neurotoxicity in human neural progenitor cells. METHODOLOGY: The drug screening was performed in order to evaluate antiviral potential of chloroquine, fingolimod (FTY720), mefloquine, tenofovir, N,N-dimethylsphingosine (DMS), azidothymidine (AZT) and betulinic acid (BA) in 3 cell lines, including HepG2 cell line, human dermal fibroblasts and human NPCs on a high-content screening platform. RESULTS: human induced pluripotent stem cells (iPSCs)-derived NPCs were successfully generated and characterized for in vitro screening assays. All the screened drugs did not display a satisfactory antiviral effect after ZIKV infection, neither on HepG2 nor on fibroblasts, except for betulinic acid, which, although indicated a mild antiviral effect on NPCs, led to less cell death after viral infection in this cell line. CONCLUSIONS: The assay based on the use of iPSCs-derived NPCs presented in this work produced consistent results for drug screening for the evaluation of neurotoxicity. In addition, betulinic acid displayed a cytoprotective effect on NPCs infected by ZIKV, as they are very susceptible to the effects of viral infection.