Desempenho da técnica nested PCR na detecção específica do complexo Mycobacterium tuberculosis em amostras sanguíneas de pacientes pediátricos

Performance of nested PCR in the specific detection of Mycobacterium tuberculosis complex in blood samples of pediatric patients

dc.creatorLima, Juliana Figueirêdo da Costa
dc.creatorMontenegro, Lílian Maria Lapa
dc.creatorMontenegro, Rosana de Albuquerque
dc.creatorCabral, Marta Maciel Lyra
dc.creatorLima, Andrea Santos
dc.creatorAbath, Frederico Guilherme Coutinho
dc.creatorSchindler, Haiana Charifker
dc.date2018-07-11T11:12:38Z
dc.date2018-07-11T11:12:38Z
dc.date2009
dc.date.accessioned2023-09-26T22:17:06Z
dc.date.available2023-09-26T22:17:06Z
dc.identifierLIMA, J. F. DA C. et al. Desempenho da técnica nested PCR na detecção específica do complexo Mycobacterium tuberculosis em amostras sanguíneas de pacientes pediátricos. Jornal Brasileiro de Pneumologia, v. 35, n. 7, p. 690–697, Jul. 2009.
dc.identifier1806-3756
dc.identifierhttps://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/27463
dc.identifier10.1590/S1806-37132009000700011
dc.identifier.urihttps://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8877307
dc.descriptionOBJETIVO: Avaliar o desempenho da técnica nested PCR (nPCR) para detectar o complexo Mycobacterium tuberculosis em amostras de sangue de pacientes com suspeita de TB para sua possível utilização como uma ferramenta auxiliar no diagnóstico laboratorial da doença em crianças. MÉTODOS: Detecção do complexo M. tuberculosis em amostras de sangue usando como alvo a sequência de inserção IS6110 do DNA genômico do bacilo. Foram avaliados 120 pacientes, menores de 15 anos de idade, de ambos os sexos, provenientes de hospitais públicos do Recife (PE), no período entre janeiro de 2003 e agosto de 2005. O diagnóstico de TB foi realizado pelo médico assistente do serviço de saúde de acordo com os critérios da Sociedade Torácica Americana. A nPCR amplificou um fragmento de 123 pb com oligonucleotídeos externos (IS1/IS2) e, na reação subsequente, com oligonucleotídeos internos (IS3/IS4), gerando um amplicon de 81 pb. Resultados: A TB ativa ou latente esteve presente em 65 pacientes, foi descartada em 28 suspeitos e 27 não tinham a doença (controles). A sensibilidade da nPCR foi de 26,15%, sendo significativamente maior na forma extrapulmonar (55,56%) em relação à pulmonar (18,18%), e a especificidade foi de 92,73%. CONCLUSÕES: Diante das dificuldades diagnósticas da TB infantil e do baixo número de casos estudados, a nPCR em sangue demonstrou ser uma técnica rápida e específica, mas com baixa sensibilidade. Para saber a sua real utilidade no diagnóstico de formas paucibacilares, sobretudo as extrapulmonares, novas pesquisas devem ser desenvolvidas com uma casuística maior de crianças e com outros espécimes biológicos além do sangue.
dc.descriptionOBJECTIVE: To evaluate the performance of nested PCR (nPCR) in detecting the Mycobacterium tuberculosis complex in blood samples of patients suspected of having TB, in order to determine its potential for use as an auxiliary tool in the laboratory diagnosis of TB in children. METHODS: Detection of the M. tuberculosis complex in blood samples using as a target the insertion sequence IS6110 of the genomic DNA of the bacillus. Blood samples of 120 patients were evaluated. All of the patients were under 15 years of age at the time of their treatment at public hospitals in the city of Recife, Brazil (between January of 2003 and August of 2005). Attending physicians at the hospitals diagnosed TB based on the criteria recommended by the American Thoracic Society. The nPCR amplified a 123-bp fragment with outer oligonucleotides (IS1/IS2) and, in the subsequent reaction, using inner oligonucleotides (IS3/IS4), generating an 81-bp amplicon. RESULTS: Active or latent TB was found in 65 patients, TB was ruled out in 28 suspected cases, and 27 patients were TB-free (controls). The sensitivity of nPCR was 26.15% and was significantly higher for the extrapulmonary form of the disease (55.56%) than for the pulmonary form (18.18%). The specificity was 92.73%. CONCLUSIONS: Despite the difficulties in diagnosing TB in children and the low number of cases evaluated in the present study, nPCR in blood samples proved to be a rapid and specific technique, albeit one with low sensitivity. In order to establish its true usefulness in the diagnosis of paucibacillary forms, especially extrapulmonary TB, further studies need to be carried out with a larger sample of children and analyzing biological specimens other than blood.
dc.formatapplication/pdf
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dc.languagepor
dc.rightsopen access
dc.subjectTuberculose
dc.subjectDiagnóstico
dc.subjectSangue
dc.subjectReação em cadeia da polimerase
dc.subjectTuberculosis
dc.subjectDiagnosis
dc.subjectBlood
dc.subjectPolymerase chain reaction
dc.subjectTuberculose Latente / diagnóstico
dc.subjectMycobacterium tuberculosis / genética
dc.subjectReação em Cadeia da Polimerase / normas
dc.subjectTuberculose Pulmonar / diagnóstico
dc.subjectEstudos de caso-controle
dc.titleDesempenho da técnica nested PCR na detecção específica do complexo Mycobacterium tuberculosis em amostras sanguíneas de pacientes pediátricos
dc.titlePerformance of nested PCR in the specific detection of Mycobacterium tuberculosis complex in blood samples of pediatric patients
dc.typeArticle


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