Derivados canabinóides extraídos da Cannabis sativa L., principalmente o canabidiol (CBD), têm demonstrado eficácia no tratamento de epilepsia grave e na diminuição das crises convulsivas em pacientes epilépticos refratários ao tratamento convencional. O uso medicinal de CBD e de  9 -tetrahidrocanabinol (THC) é regulamentado em diversos países sendo usados como princípios ativos de medicamentos. No Brasil, em 2016, através da RDC 66/2016, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária autorizou a importação para uso médico pessoal, de C. sativa L, de partes da planta e de extratos contendo CBD e THC. Visando a segurança do paciente e devido ao uso pretendido prolongado, o objetivo desse estudo foi avaliar a citotoxicidade e a genotoxicidade in vitro de extrato de C. sativa em triglicerídeo de cadeia média (TCM). O extrato, com 25 mg/mL de CBD e 1 mg/mL de THC, foi preparado e padronizado pelo Laboratório de Análises Toxicológicas da UFRJ e utilizado por criança de uma família brasileira no controle de convulsões com epilepsia refratária. O ensaio Cometa (EC) e o ensaio de micronúcleo pelo bloqueio da citocinese (EMnBC) em células de sangue total humano (CSTH) in vitro, foram realizados na ausência e na presença de mistura S9 de fígado de rato induzido pelo Aroclor 1254. No EC, o tratamento das CSTH com o veículo TCM (1,3 a 20%) e com extrato de C. sativa (CBD 0,3; 1,0; 2,0 e 5,0 mg/mL) na ausência de S9 não induziu dano significativo ao DNA (p > 0,05) quando comparadas aos controles celular e veículo TCM correspondente, respectivamente. O extrato de C. sativa (CBD 0,3; 1,0; 2,0 e 5,0 mg/mL) na presença de S9 induziu dano significativo ao DNA (p < 0,05) em CSTH nas concentrações de CBD 1,0 e 2,0 mg/mL testadas quando comparadas ao controle solvente TCM correspondente com S9. No EMnBC, o tratamento com o extrato de C. sativa (CBD 0,3; 0,6; 1,3; 2,5 e 5,0 mg/mL) e TCM (2,5 a 20%), na presença e ausência de mistura S9, não induziu quebras cromossômicas e/ou ganho ou perda de cromossomos em linfócitos humanos. Logo, concluiu-se que o extrato de C. sativa em TCM, nas 5 concentrações de CBD testadas, foi considerado não mutagênico em CSTH não induzindo efeitos clastogênico e/ou aneugênico em linfócitos humanos, na presença e ausência da mistura S9Cannabinoid derivatives extracted from Cannabis sativa L., mainly cannabidiol (CBD), have shown efficacy in the treatment of severe epilepsy and in the reduction of seizures in epileptic patients refractory to conventional treatment. The medicinal use of CBD and  9 tetrahydrocannabinol (THC) is regulated in several countries and used as active ingredients in medicines. In Brazil, in 2016, through RDC 66/2016, the Brazilian National Health Surveillance Agency authorized the importation for personal medical use of C. sativa L, plant parts and extracts containing CBD and THC. Taking into account the patient safety and due to prolonged intended use, the aim of this study was to evaluate the in vitro cytotoxicity and genotoxicity of C. sativa extract on medium chain triglyceride (MCT). The extract, with 25 mg/mL of CBD and 1 mg/mL of THC, was prepared and standardized by the Toxicological Analysis Laboratory of UFRJ and used by a child of a Brazilian family to control seizures with refractory epilepsy. The in vitro Comet assay (CA) and the in vitro cytokinesis-block micronucleus (CBMN) assay in whole human blood cells (WHBC) were performed in the absence and presence of Arochlor 1254-induced rat liver S9 mixture. In the CA, treatment of WHBC with MCT vehicle (1.3 to 20%) and with C. sativa extract (CBD 0.3; 1.0; 2.0 and 5.0 mg/mL) in the absence of S9 did not induce significant DNA damage (p > 0.05) when compared to the untreated and corresponding MCT vehiclecontrols, respectively. The extract of C. sativa (CBD 0.3; 1.0; 2.0 and 5.0 mg/mL) in the presence of S9 induced significant DNA damage (p < 0.05) in WHBC at the concentrations of CBD 1.0 and 2.0 mg/mL tested when compared to the corresponding TCM solvent control with S9. In the CBMN assay, treatment with C. sativa extract (CBD 0.3; 0.6; 1.3; 2.5 and 5.0 mg/mL) and MCT (2.5 to 20%), in the presence and absence of S9 mixture, did not induce chromosomal breaks and/or chromosome gain or loss in human lymphocytes. Therefore, it was concluded that the extract of C. sativa in TCM, in the 5 concentrations of CBD tested, was considered non-mutagenic in WHBC not inducing clastogenic and/or aneugenic effects in human lymphocytes, in the presence and absence of the S9 mixture