Dissertation
Estudo ultraestrutural da resposta imune celular em Rhodnius prolixus (Hemiptera; Reduviidae; Triatominae)
Ultrastructural study of the immune cellular response in Rhodnius prolixus (Hemiptera; Reduviidae; Triatominae)
Registro en:
Borges, Andrezza Raposo. Estudo ultraestrutural da resposta imune
celular em Rhodnius prolixus (Hemiptera; Reduviidae; Triatominae). 2006. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) – Departamento de Saúde Coletiva, Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2006.
Autor
Borges, Andrezza Raposo
Resumen
No presente estudo nós usamos microscopia eletrônica e confocal a laser para caracterizar morfologicamente os hemócitos de ninfas de quinto estádio em Rhodnius prolixus, bem como a resposta imune celular deste inseto contra partículas bióticas e abióticas. Seis tipos de hemócitos foram encontrados: prohemócitos, plasmatócitos, oenocitóides, granulócitos tipo I e tipo II e adipohemócitos. Plasmatócitos e prohemócitos foram os tipos celulares mais abundantes nestes insetos. Através do uso da marcação com laranja de acridina e microscopia confocal a laser os prohemócitos
foram facilmente distinguidos das demais células por apresentarem fluorescência homogênea e ausência de compartimentos ácidos. Os plasmatócitos, granulócitos tipo I e II e os oenocitóides apresentaram compartimentos acídicos que variaram em tamanho, distribuição e intensidade de fluorescência. Oenocitóides apresentaram uma forte fluorescência no citoplasma e uma marcação característica no núcleo. Uma fraca marcação foi observada nos adipohemócitos e as inclusões lipídicas presentes no citoplasma destas células não puderam ser visualizadas através da microscopia confocal. A porcentagem relativa de plasmatócitos e prohemócitos variou consideravelmente após a inoculação de bactérias e partículas de látex. Nossos dados demonstraram que os plasmatócitos são os únicos tipos celulares envolvidos na fagocitose. Como em células de mamíferos, dois modos distintos de fagocitose puderam ser observados: fagocitose tipo “trigger” e “zipper”. Processos de melanização
e microagregação não foram observados contra partículas de látex e Escherichia coli. Por outro lado, R. prolixus produziu uma forte reação de melanização contra Staphylococcus aureus. As alterações ultraestruturais observadas em plasmatócitos, adipohemócitos e oenocitóides sugerem que estes hemócitos estão diretamente envolvidos na defesa imune de R. prolixus contra partículas estranhas. In the present study we used the combination of confocal and electron microscopy to
best characterize the hemocytes 5th –instar nymphs of the triatomine bug Rhodnius
prolixus, as well as the immune cellular response elicit by this insect to biotic and abiotic
targets. Six hemocytes types were found in the hemolymph of R. prolixus:
prohemocytes, plasmatocytes, oenocytoids, adipocytes and granulocytes type I and II.
Plasmatocytes and prohemocytes were the most abundant cells found in these insects.
By using both acridine orange staining and confocal laser microscopy, prohemocytes
can be easily distinguished from the other types due to their homogeneous fluorescence
and the absence of acid compartments. Plasmatocytes, granulocytes type I and II and
oenocytoids presented intracellular acidic compartments which varies in size, distribution
and fluorescence intensity. Oenocytoids presented a bright green fluorescence in the
cytoplasm and characteristic nucleus staining. An weak staining was observed in
adipohemcytes and the lipid inclusions present in the cytoplasm were not visualized
under confocal microscopy. The relative percentage of plasmatocytes and
prohemocytes changed considerably after immune challenge with both latex beads and
bacteria. Our data demonstrated that plasmatocytes were the only cell type involved in
the phagocytosis. As in mammal cells, the trigger and zipper modes of phagocytosis
were observed. Neither melanization nor micro-aggregation were observed towards
latex particles or Esccherichia coli. On the other hand, R. prolixus produced a strong
melanization reaction against Staphylococcus aureus. The ultrastructural changes
observed in plasmatocytes, adipohemocytes and oenocytoids suggest that these
hemocytes types are directly involved in the immune defense of R. prolixus against
foreign particles.