Resumen: En zonas rurales de Paraguay los herbicidas son ampliamente utilizados, entre los cuales se encuentran un gran número que son elaborados a base de glifosato, estos actúan inhibiendo la actividad de enzimas que sintetizan aminoácidos aromáticos en las plantas. Estudios han demostrado que no poseen actividad geno- tóxica, sin embargo, otras investigaciones indican lo contrario. Esta investigación tiene por objetivo principal evaluar la actividad mutagénica de tres herbicidas a base de glifosato (formulación comercial) en Drosophila melanogaster mediante el ensayo SMART. El diseño del estudio fue de bloques al azar, donde se trataron larvas de D. melanogaster tanto en cruce estándar y en cruce de alta bioactivación por 72±5 horas con diferentes concentraciones de los tres herbicidas a base de glifosato (0,01, 0,1, 1 y 10 mg.mL-1), como agente mutágeno se empleó Ciclofosfamida a concentraciones de 2,61 y 0,78 mg.mL-1, como testigo agua destilada. Los resultados obtenidos no fueron estadísticamente significativos, sin embargo, el herbicida GBH2 a la concentración de 10 mg.mL-1 evidenció un aumento significativo de clones mutantes del tipo mancha simple pequeña y en el total de mutaciones en comparación al testigo empleado.