El efecto in vivo sobre el pH del Biofilm dental interproximal de colutorios de, Clorhexidina al 1% y Fluoruro de Sodio al 0.25% (2500 ppm), fue estudiado y comparado por mediciones ex vivo. 12 voluntarios fueron seleccionados y distribuidos al azar en tres grupos: a) Control, b) Clorhexidina y c) Fluoruro. Las muestras fueron recolectadas de zonas interproximales de dientes posteriores y dispersadas sobre varillas indicadoras de pH. El registro se obtuvo observando las muestras bajo magnificación estereoscópica. Con posterioridad al registro del pH en reposo, los grupos se enjuagaron con una solución de sacarosa al 10% por dos minutos, obteniéndose un segundo registro a los 20 minutos. En todos los grupos se realizaron tres muestras sucesivas a los 50, 80 y 110 minutos, siendo observadas y registradas por cada examinador. Posteriormente, los grupos b) y c) se enjuagaron con sus respectivos agentes terapéuticos, para recolectar las tres muestras correspondientes, siendo mantenidas ellas bajo desafío acidogénico. Los resultados mostraron que los valores del pH en reposo y en actividad entre los tres grupos no presentaron diferencias significativas (p0.05). En el grupo Clorhexidina, los valores fueron significativos respecto al Control desde los 65 minutos (p0.05). En el grupo Fluoruro, sólo a los 70 minutos presentó diferencia significativa al ser comparado con el Control (p0.05). Es posible concluir que el mejor efecto en impedir la baja de pH en un Biofilm se logra con un enjuagatorio de Clorhexidina al 1%, obteniéndose valores de pH sobre 6.0 luego de 80 minutos de aplicado el colutorio.