Trabajo de grado - Maestría
Evaluación de etilenglicol y leche en polvo descremada como crioprotectores en la criopreservación de semen de Bocachico Prochilodus magdalenae
Author
Cabrales Hessen, Soad Samira
Institutions
Abstract
Bocachico Prochilodus magdalenae es una especie endémica de Colombia y sus volúmenes de captura la ubican como la más importante de las pesquerías continental colombiana; no obstante, en los últimos cuarenta años sus capturas han disminuidos aproximadamente el 70%, por tanto ha sido categorizada como vulnerable a la extinción. Entre las causas de este declive se señalan la degradación ambiental, pérdida de planos inundables y la fuerte presión pesquera. La criopreservación se destaca como una estrategia importante de conservación ex situ in vitro en especies con riesgo de extinción o vulnerables. Por tanto el objetivo del estudio fue evaluar el etilenglicol (EG) y la leche en polvo descremada (LP) en la criopreservación de semen de bocachico. La solución crioprotectora estuvo compuesta por EG (6%, 8% o 10%), LP (3%, 5% o 7%) y como diluyente se utilizó una solución de glucosa al 6%. El semen fue diluido en proporción 1:3 (semen:diluyente) a temperatura de 28±1ºC y envasado en pajillas de 0.5 mL. Se utilizó un diseño factorial (3x3) completamente al azar, para un total de nueve tratamientos y se analizó el semen fresco como control para comparar la calidad del semen descongelado. En el semen fresco se evalúo volumen, color, tiempo de activación, movilidad total y concentración espermática; mientras que en el semen descongelado se evaluó movilidad total, tipos de movilidad y velocidad espermática. El porcentaje de inclusión de EG en el rango evaluado (6-10%), no afectó significativamente (p>0.05) ninguna de las variables de calidad seminal analizadas con excepción de la tasa de eclosión (p<0.05). Mientras que la LP presento efectos significativos (p<0.05) sobre el porcentaje de espermatozoides estáticos y altamente significativo (p<0.01) sobre el desempeño reproductivo (tasa de fertilización y eclosión). El mayor valor de movilidad total se obtuvo cuando se criopreservó con EG10xLP7 (38.4±18.4%) sin observarse diferencia significativa (p<0.05) con los tratamiento que utilizaron EG al 6 y 8% a cualquier porcentaje de inclusión de la LP (3-7%) que oscilaron entre 27.8±4.8% (EG8xLP3) y 34.3±18.1% (EG8xLP7). La mayor fertilidad fue de 64.2±15.1% se encontró en el semen criopreservado EG6xLP3, lo que equivale al tratamiento con menor inclusión de crioprotectores. Los resultados del estudio permitieron concluir que concentraciones mayores a 6% de EG con porcentajes de inclusión de LP mayores a 5% pueden tener efecto negativo sobre el espermatozoide de Prochilodus magdalenae, causándole una disminución de su calidad y afectando su capacidad fertilizante RESUMEN…… 10 1. INTRODUCCIÓN…… 11 2. MARCO TEORICO…… 13 2.1 GENERALIDADES DEL BOCACHICO Prochilodus magdalenae…….. 13 2.1.1 Bio-ecología…… 13 2.2 CRIOCONSERVACIÓN DE SEMEN…… 14 2.2.1 Generalidades en peces…… 14 2.2.3 Crioconservación de semen en peces de Colombia…… 16 2.3 CRIOPROTECTORES…… 19 2.3.1 Crioprotectores permeables…… 20 2.3.2 Crioprotectores no permeables…… 21 2.3.3 Leche en polvo (LP) y etilenglicol (EG) como crioprotectores…… 23 2.4 CALIDAD SEMINAL…… 25 2.4.1 Movilidad espermática…… 25 2.4.2 Tiempo de motilidad o actividad espermática….. 25 2.4.3 Velocidades espermáticas…… 25 2.5 DESEMPEÑO REPRODUCTIVO…… 26 3. OBJETIVOS…… 27 3.1 OBJETIVO GENERAL…… 27 3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS…… 27 4. MATERIALES Y MÉTODOS…… 28 4.1 LOCALIZACIÓN DEL ESTUDIO…… 28 4.2 MATERIAL BIOLOGICO…… 28 4.2.1.Seleccion de reproductores…… 28 4.2.2.Induccion al desove…… 29 4.3 OBTENCIÓN DEL SEMEN….. 29 4.4 TRATAMIENTOS Y CRIOCONSERVACIÓN DEL SEMEN…… 29 4.4.1.Congelacion y descongelación del semen…… 30 4.5 CALIDAD SEMINAL…… 31 4.5.1. Volumen y color…… 31 4.5.2. Movilidad total, velocidad y progresividad espermática…… 31 4.5.3. Tiempo de activación…… 32 4.5.4. Concentración espermática…… 32 4.6 DESEMPEÑO REPRODUCTIVO…… 32 4.6.1.Fertilidad…… 33 4.6.2. Eclosión…… 33 4.7 CALIDAD DE AGUA…… 34 4.8 CONSIDERACIONES ETICAS…… 34 4.9 ANALISIS ESTADISTICOS…… 34 5. RESULTADOS Y DISCUSION…… 35 5.1 EVALUACIÓN DE SEMEN FRESCO…… 35 5.2 EVALUACIÓN DE SEMEN CRIOCONSERVADO…… 36 5.2.1 Efecto de factores y su interacción …… 36 5.3 CALIDAD DEL SEMEN CRIOCONSERVADO (DESCONGELADO)…… 37 5.3.1 Movilidad total…… 39 5.3.2 Progresividad total…… 40 5.3.3 Tipos de movilidades…… 41 5.3.4 Velocidades espermáticas…… 42 5.4 DESEMPEÑO REPRODUCTIVO DE SEMEN CRIOCONSERVADO…… 44 5.4.1 Fertilidad…… 44 5.4.2 Eclosión…… 46 6. CONCLUSION…… 49 7. BIBLIOGRAFIA…… 50 Maestría Magíster en Ciencias Ambientales