Trabajo de grado - Pregrado
Identificación de cepas nativas de Trichoderma spp. biocontroladoras de Sclerotium sp. y promotoras de crecimiento en plantulas de berenjena (Solanum melongena L.) en Córdoba
Autor
Martínez De La Ossa, Keyla
Vargas Ávila, Marisela
Institución
Resumen
El cultivo de berenjena (Solanum melongena L.) constituye la hortaliza de mayor importancia en el departamento de Córdoba. Sin embargo, dentro de los retos productivos de este cultivo está el manejo de la marchitez y muerte de las plantas causadas por la presencia del hongo Sclerotium spp., el cual causa marchitez y muerte de plantas. Adicionalmente, la nutrición del cultivo está soportada en el uso de fertilizantes de síntesis química, que causan contaminación ambiental. El objetivo de este estudio fue contribuir con el manejo fitosanitario de Sclerotium sp. y la nutrición en plántulas de berenjena mediante el uso de cepas Trichoderma spp., aisladas de lotes comerciales del cultivo en la zona productora del departamento. Se tomaron muestras de suelo en lotes comerciales en los municipios de Montería, Cereté, San Pelayo y Tierralta. Cada muestra estuvo constituida de cinco submuestras de suelo rizosférico. Las muestras fueron procesadas usando la técnica de dilución seriada (103 conidias. mL-1). Los aislamientos de Trichoderma spp. fueron purificados en PDA y caracterizados morfológica, morfométrica y molecularmente. La capacidad biocontroladora in vitro de cada cepa de Trichoderma spp., sobre Sclerotium spp., se determinó mediante la técnica de cultivos duales en medio Papa Dextrosa Agar (PDA), midiendo el porcentaje de crecimiento radial. La capacidad promotora de germinación en semillas y crecimiento de plántulas fue evaluada en cada cepa de Trichoderma spp. en condiciones de laboratorio y casa malla, respectivamente. Diez cepas fueron aisladas de las zonas muestreadas. De seis cepas aisladas en el municipio de Cereté, dos correspondieron a Trichoderma asperellum, una a T. virens y tres a Trichoderma sp. En San Pelayo se aislaron dos cepas y se clasificaron efectivamente como aislados de Trichoderma sp. Dos cepas más se identificaron en Tierralta, correspondientes a Trichoderma lixii y T. asperellum. En la evaluación de cultivos duales, las especies Trichoderma lixii (T001) y Trichoderma asperellum (T007 y T008) presentaron mayor capacidad biocontroladora contra el hongo Sclerotium. Adicionalmente, T. lixii (T001) generó el mayor porcentaje de semillas germinadas con 88,75%; seguido por Trichoderma sp. (T002) con 80,50%, el cual además generó el mayor PICR después de 72 horas de evaluación. De igual manera, los aislamientos provenientes de Cereté; T. virens (T005) y T. asperellum isolate TV190 (T008) y el aislado de San Pelayo, Trichoderma sp. Isolate SDAS203498, mostraron mayor capacidad para promover el crecimiento de plántulas en las variables masas seca de tallo (MST), masa seca de raíz (MSR), masa seca total (MT), altura de planta (AP) y longitud de raíz (LRAÍZ). El número de hojas y nudos (NH y NN respectivamente) no fue afectado por el efecto promotor de Trichoderma. Estos resultados nos permiten inferir que el o los aislamientos T. lixii (T001), Trichoderma sp. (T006) y T. asperellum (T008) son promisorios para el manejo de Sclerotium y la inducción y desarrollo del crecimiento de plántulas de berenjena. CONTENIDO RESUMEN GENERAL 14 ABSTRACT GENERAL 15 CAPÍTULO I 16 INTRODUCCIÓN GENERAL 16 1.1 INTRODUCCIÓN 17 1.2 DEFINICIÓN DE PROBLEMA 19 1.3 GENERALIDADES DE LA TEMÁTICA 21 1.3.1 El cultivo de Berenjena en la región Caribe Colombiana. 21 1.3.2 Uso de bioinsumos en la agricultura moderna. 21 1.3.3 El género Trichoderma y sus características. 22 1.3.4 Ventajas del uso de Trichoderma en la agricultura. 23 1.3.5 Mecanismos de acción de Trichoderma spp. sobre las plantas. 24 1.3.6 Estudios sobre cepas de Trichoderma en el cultivo de Berenjena. 26 1.3.7 Antagonismo de Trichoderma sobre Sclerotium rolfsii como agente causal de la marchitez de la Berenjena. 27 1.3.8 Estudios de caracterización molecular de cepas de Trichoderma. 28 1.4 OBJETIVOS 31 1.4.1 Objetivo general 31 1.4.2 Objetivos específicos 31 1.5 LITERATURA CITADA 32 CAPÍTULO II 40 AISLAMIENTO DE CEPAS DE Trichoderma spp. DE SUELOS CULTIVADOS CON BERENJENA EN CÓRDOBA 40 RESUMEN 41 ABSTRACT 42 2.1 INTRODUCCIÓN 43 2.2 METODOLOGÍA 44 2.2.1 Localización y época de evaluación. 44 2.2.2. Toma de muestras en campo. 44 2.2.3. Análisis de suelos y georreferenciación. 44 2.2.4. Procesamiento de muestras. 44 2.2.5. Obtención de aislamientos y purificación de los hongos. 44 2.2.6. Identificación de los aislamientos. 45 2.3 RESULTADOS Y DISCUSIÓN 46 2.3.1 Aislamiento de cepas nativas de Trichoderma spp. 46 2.4 CONCLUSIONES 48 2.5 LITERATURA CITADA 49 CAPÍTULO III 51 CARACTERIZACIÓN MORFOMÉTRICA Y MOLECULAR DE AISLAMIENTOS DE Trichoderma spp. 51 RESUMEN 52 ABSTRACT 53 3.1 INTRODUCCIÓN 54 3.2 METODOLOGÍA 55 3.2.1 Localización y época de evaluación. 55 3.2.2 Recolección de muestras en campo. 55 3.2.3 Procesamiento en laboratorio 55 3.2.4 Caracterización morfométrica de las cepas 55 3.2.5 Caracterización e identificación molecular de aislamientos. 55 3.3 RESULTADOS Y DISCUSIÓN 58 3.3.1 Caracterización morfométrica de cepas nativas. 58 3.3.2 Caracterización molecular de cepas. 62 3.4. CONCLUSIONES 70 3.5. LITERATURA CITADA 71 CAPÍTULO IV 73 EVALUACIÓN DEL POTENCIAL ANTAGÓNICO In-vitro DE Trichoderma spp. CONTRA Sclerotium sp. 73 RESUMEN 74 ABSTRACT 75 4.1. INTRODUCCIÓN 76 4.2. MATERIALES Y METODOS 79 4.2.1. Localización. 79 4.2.2. Material biológico. 79 4.2.3. Ensayos de antagonismo in vitro (cultivos duales). 79 4.2.4. Evaluación de Trichoderma spp. sobre la germinación de semillas 80 4.2.5. Evaluación del efecto de las cepas de Trichoderma sobre el crecimiento de plántula de Berenjena. 81 4.2.6. Diseño experimental: 81 4.2.7. Análisis estadístico. 82 4.3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 83 4.3.1. Capacidad antagónica in vitro de cepas de Trichoderma spp. contra Sclerotium sp. 83 4.3.2. Efecto de las cepas de Trichoderma sobre la germinación de semillas de Berenjena en laboratorio. 86 4.3.3. Efecto de las cepas de Trichoderma sobre el crecimiento de plántulas de Berenjena. 87 4.4. CONCLUSIONES 92 4.5. LITERATURA CITADA 93 CAPÍTULO V 100 5. DISCUSIÓN GENERAL 101 5.1. LITERATURA CITADA 103 6. CONCLUSIÓN GENERAL 107 Pregrado Ingeniero(a) Agronómico(a) Trabajos de Investigación y/o Extensión