Las plagas y enfermedades en el cultivo de café han incrementado, requiriendo el uso de tecnologías para propagar variedades resistentes. Una de las principales alternativas para producir plantas sanas y genéticamente iguales en grandes cantidades es la propagación in vitro. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de fitohormonas en explantes foliares de café variedad Obatá. Las fitohormonas evaluadas fueron ácido salicílico 1.38 µg/L, 2,4-D 0.5 mg/L, 2,4-D 0.25 mg/L+ kinetina 0.5 mg/L, picloram 0.1 mg/L y thidiazuron (TDZ) 0.2 mg/L. Se evaluó el crecimiento callogénico, presencia en bordes y nervadura y características del callo (compacto y/o friable) por explante para cada uno de los tratamientos. Se utilizó un diseño completamente al azar. El ácido salicílico, TDZ y picloram no indujeron la formación de callo en los explantes. El medio suplementado con 2,4-D + kinetina fue el que presentó el mayor porcentaje (96%) de explantes con callo. 2,4-D presentó mayor porcentaje de callo compacto (69%) y de 2,4-D + Kinetina presentó mayor porcentaje de callo compacto + friable (45%) y mayor porcentaje de bordes con callo (79%). El medio suplementado con 2,4-D 0.25 mg/L + Kinetina 0.5 mg/L es el más favorable para la formación de callo compacto en explantes foliares de café variedad Obatá.