Article
Production and characterization of F(Ab')(2) fragments obtained by enzymatic digestion from Murine anti-MRSA PBP2a Monoclonal Antibodies
Fecha
2018Registro en:
ARAUJO, Anna Erika Vieira de et al. Production and characterization of F(Ab’)2 fragments obtained by enzymatic digestion from Murine anti-MRSA PBP2a Monoclonal Antibodies. Applied Biochemistry and Biotechnology, v. 185, n. 1, p. 72-80, May 2018.
0273-2289
10.1007/s12010-017-2624-z
1559-0291
Autor
Araujo, Anna Erika Vieira de
Souza, Natalia Plinio de
Sousa, Alvaro Paiva Braga de
Lara, Flavio Alves
Senna, Jose Procopio Moreno
Institución
Resumen
Infecções causadas por Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) são problemas de saúde em todo o mundo. Em um estudo anterior, um anticorpo monoclonal murino (mMAB), capaz de se ligar a PBP2a dentro de cepas de MRSA, foi gerado. Os fragmentos de anticorpo F (ab ') 2 são amplamente descritos na literatura como ferramentas imunoquímicas e reagentes para diagnóstico e terapêutica, particularmente devido à sua baixa imunogenicidade e farmacocinética rápida. Neste estudo, os fragmentos F (ab ') 2 do mMAB foram gerados por digestão enzimática, utilizando pepsina. Eles foram purificados por cromatografia de afinidade usando proteína A e concentrada por uma unidade de filtração MWCO 50 kDa. Os resultados indicam que é possível obter fragmentos F (ab ') 2 por digestão com pepsina. Dados de ELISA, Western blotting e microscopia de fluorescência demonstraram que a afinidade F (ab ') 2 para PBP2a não se perde mesmo após o processo de digestão enzimática. Como esperado, nos testes farmacocinéticos, F (ab ') 2 apresentou uma eliminação mais rápida (entre 12 e 18 h) em comparação com IgG. Estes fragmentos F (ab ') 2 podem ser utilizados em futuras aplicações de diagnóstico imunológico, incluindo radiomarcação in vitro ou in situ e no tratamento de infecções causadas por este importante patógeno.