Análise do espaçador intergênico do gene de calmodulina em parasitas da família Trypanosomatidae Trypanosomatidae: potencial como marcador molecular

Abstract

A caracterização e descrição de espécie na família Trypanosomatidae aindaa depende da morfologia e identidade de ho ospedeiros dos tripanossomatídeos. Embora várioos marcadores moleculares tenham sido descriitos nas ultimas décadas nenhum deles tem sido proposto como uma ferramenta molecular defin nitiva para complementar a informação ministrada pelas análises morfológicas. Com objetivo dee avaliar o potencial do espaçador intergênico o do gene de calmodulina como marcador molecular e estudar a composição desta a região nos tripanossomatídeos, foram ampl lificados clonados e seqüenciados os espaçadores intergênicos de Crithidia fasciculata, C. deane ei, C. guilhermei, C. acanthocephali, C. luciliae , C. desouzai, Trypanosoma rangeli e compara ados com as sequências que estão publicamente diisponíveis de T. brucei, T. cruzi, Leishmania mex xicana, L. major, L. infantum, L. tarentolae e Phytom monas serpens. Características como organizaçã ão genética do gene de calmodulina, conteúdo de G G+C e presença de repetições de simples sequêência também foram avaliados. O gene de calmo odulina mostrou estar organizado in tandem de dduas a quatro copias separados por espaçadores intergênicos os quais podem apresentar variaç ção no tamanho. Estes espaçadores mostraram ppouca variação intraespecífica no seu conteúd do de G+C sem importar qualquer diferença de tamanho. Nos tripanossomatídeos monoxênico os a tendência aponta que os organismos com um espaçador intergênico maior apresentam um m conteúdo maior de G+C. Evidenciou-se a presenç ça de repetições de sequência simples nos espaaçadores, elementos vinculados com a regulação o da expressão genética dos tripanossomatídeoss. Embora o espaçador de calmodulina mostre var riabilidade entre as copias do gene, nós demonst tramos que sequências na região 5'UTR localizadas s imediatamente antes do codon de inicio são esppécie-específicas. Uma vez que este segmento gen nético é de fácil amplificação e esta limitado po or uma sequência conservada (ORF), resulta factív vel desenvolver uma ferramenta molecular que auxilie a morfologia tradicional na identificação d de espécies na família Trypanosomatidae.