Dissertation
Caracterização molecular de uma nova proteína tirosina quinase, SmFes, de Schistosoma mansoni.
Fecha
2005Registro en:
RIBEIRO, Fernanda Ludolf. Caracterização molecular de uma nova proteína tirosina quinase, SmFes, de Schistosoma mansoni. 2005. 142 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde - Biologia Celular e Molecular)-Ministério da Saúde. Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa René Rachou. Programa de Pós Graduação em Ciências da Saúde. Belo Horizonte. 2005
Autor
Ribeiro, Fernanda Ludolf
Institución
Resumen
A identif
icação de moléculas sinalizadoras
e a elucidação
de processo
s de transdução
de sinal
de
Schistosoma
mansoni
são necessárias
para o entendi
mento da interação
hospedeiro-
parasito
e de proces
sos fisiológicos
do parasito.
Proteínas
tirosinas
quinase
(PTK
s) são
molécu
las importan
tes na comunica
ção intra e intercelu
lar, tendo
um papel
crucial
nos
mecan
ismos de transdução
de sinal.
Estas
proteínas
estão
envolvidas
nos processo
s de
desenvolvim
ento,
diferenciação
e comuni
cação
celular
entre
outros.
Uma
nova
PTKs foi
identificad
a em
S. mansoni
e nomeada,
SmFes.
SmFes
é um gene de cópia
única
e o seu
cDNA comple
to contém
uma ORF
de 3.780
pb. SmFes
exibe
característi
cas da família
Fes/Fps/Fer
das PTKs,
com assinaturas
de domín
io proteína
quinase,
SH2 e
coiled-
coil
característ
icos. SmFes
é o prime
iro gene da família Fes/Fp
s/Fer
identificado
em
S. mansoni.
Análise
filogenétic
a revelou
que SmFes
está relacionada
a proteínas
da família Fes/Fps/Fer,
agrupadas
mais próximas
às proteínas
ortólogas
de organismos
invertebrados.
O alinham
ento
entre
o cDNA de SmFes
e seqüências
genôm
icas depositadas
pelos
bancos
de dados
de
S.
mansoni
indicara
m a presença
de 17 introns,
alguns
demonstrados
experi
mentalmente.
Análises
parciais
de clones
de cDNA
indicara
m a inserção
de 9 pb na posição
3’ do exon 10,
formando
duas populações
de cDNA,
comprovadas
por RFLP.
A análise
da seqüência
genômic
a indicou
que existem
dois possíveis
sítios
de edição
do RNA na proximidad
e 5’ do
intron,
indicando
um evento
de edição
alternat
iva. A existência
de um alelo
contendo
uma
inserção
de 15 pb na seqüência
genômi
ca foi observada.
As amplif
icaçõ
es de diferentes
espécies
de
Schistosoma
com pares
de iniciador
es desenhados
para SmFes
indicara
m a
presença
de ortólogos
de SmFes
em várias
espécies
do gênero.
SmFes
é transcrita
em baixos
níveis
nas diversas
fases
de desenvolvi
mento do parasito,
com uma maior taxa de transcrição
em verm
es machos,
como
detectado
por PCR em tempo
real e
northern-
blot.
A expressão
da
proteína
SmFes
foi verificada
em esporocisto,
mirac
ídio, verme
adulto
e em nível
mais
elevado
em cercári
a. Uma proteína
recombinan
te de SmFes
foi expressa
para ser usada
em
experim
entos
de identif
icação de parceiros
de SmFes
em futuros
ensaios
de co-precipitaç
ão e
també
m em experim
entos
de duplo
híbrido.
Vários
possíveis
parceiros
de SmFes
foram
identificados
por análise
compu
tacion
al. A compre
ensão
de genes
envolvidos
nos
mecan
ismos de transdução
de sinal pode
fornecer
novas
estratégias
de desenvolvi
mento
de
drogas.