dc.contributor | De Simone, Salvatore Giovanni | |
dc.contributor | Leon, Leonor Laura | |
dc.contributor | Calabrese, Kátia da Silva | |
dc.contributor | Castro, Helena Carla de | |
dc.contributor | Castro, Solange Lisboa de | |
dc.contributor | Guedes, Heberth Leonel de Mattos | |
dc.contributor | Gaspar, Ana Maria Coimbra | |
dc.creator | Souza, André Luis Almeida | |
dc.date.accessioned | 2013-09-16T23:26:21Z | |
dc.date.accessioned | 2023-09-05T12:18:35Z | |
dc.date.available | 2013-09-16T23:26:21Z | |
dc.date.available | 2023-09-05T12:18:35Z | |
dc.date.created | 2013-09-16T23:26:21Z | |
dc.date.issued | 2012 | |
dc.identifier | Souza, André Luis Almeida Estudo estrutural e da atividade biocida da Temporizina: um peptídeo híbrido com atividade antiparasitária contra o Trypanosoma cruzi / André Luis Almeida Souza. – Rio de Janeiro, 2012. xi,139 f. : 25 il. ; 30 cm. Tese (Doutorado) – Instituto Oswaldo Cruz, Pós-Graduação em Biologia Parasitária, 2012. Bibliografia: f. 76-89. | |
dc.identifier | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/6904 | |
dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8653737 | |
dc.description.abstract | Os peptídeos antimicrobianos têm se mostrado uma boa alternativa para as terapias antiparasitárias. Neste trabalho descrevemos a estrutura e a atividade biológica da temporizina (FLPLWLWLWLWLWKLK) e sua ação contra formas epimastigotas do Trypanosoma cruzi. A temporizina é um peptídeo híbrido, sintetizado a partir de outros três peptídeos antimicrobianos: a temporina A (FLPLIGRVLSGIL-NH2), a sapecina B (KLKLLLLLKLK-NH2) e a gramicidina A (HCO-VGALAVVVWLWLWLW-NHCH2). Os efeitos da temporizina sobre o Trypanosoma cruzi e sua toxicidade para células de mamíferos foram analisados utilizando as metodologias de citometria de fluxo, microscopia de fluorescência e liberação da lactato desidrogenase (LDH). O valor concentração efetiva de temporizina para lisar 50% das formas epimastigotas de Trypanosoma cruzi (EC50), foi determinado em um ensaio de viabilidade celular através do método de metabolização do brometo azul de tetrazólio (MTT). Para determinar a liberação de hemoglobina e quantificar a porcentagem de hemólise causada pela temporizina em doses letais para o Trypanosoma cruz. Utilizamos o método colorimétrico. Os dados sobre a EC50 e a capacidade hemolítica da temporizina foram então utilizados para a determinação do índice terapêutico do peptídeo. O mapeamento da estrutura da temporizina e a determinação de suas características foram obtidos através da metodologia de dicroísmo circular em um ambiente hidrofóbico que mimetizou as bicamadas das biomembranas. Submetemos a sequência da temporizina à plataforma Itasser para modelagem de proteínas e softwares, com o objetivo de realizar predições teóricas sobre a sua estrutura e características conformacionais. Para avaliar os efeitos da temporizina sobre a eletrofisiologia de membranas, foi usada a técnica de Patch-Clamp em célula inteira ou célula ligada. Essa técnica associada com experimentos envolvendo captação de corantes com diferentes valores de massa molecular permitiu determinar o limite de exclusão dos poros formados pelo peptídeo. Tendo em vista, as características estruturais e a atividade tripanocida da temporizina, concluímos que este peptídeo é uma alternativa viável para o desenho racional de um novo fármaco para o controle da doença de Chagas. | |
dc.language | por | |
dc.publisher | Instituto Oswaldo Cruz. | |
dc.rights | open access | |
dc.title | Estudo estrutural e da atividade biocida da temporizina: um peptídeo hibrido com atividade antiparasitária contra o Trypanosoma cruzi. | |
dc.type | Thesis | |