Dissertation
Estudo da aplicabilidade do ensaio de quantificação de proteínas totais em células SIRC na avaliação do potencial de irritação ocular de xampus e tensoativos
Fecha
2006Registro en:
COSTA, Rodrigo Netto. Estudo da aplicabilidade do ensaio de quantificação de proteínas totais em células SIRC na avaliação do potencial de irritação ocular de xampus e tensoativos. 2006. 60 f. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) - Escola Nacional de Saúde Pública Sergio Arouca, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2006.
Autor
Costa, Rodrigo Netto
Institución
Resumen
A crescente tendência mundial pela substituição do uso de animais em
experimentação promoveu a busca por métodos alternativos. Particular ênfase é dada ao
desenvolvimento de métodos para substituir o tradicional Teste de Draize, utilizado para
acessar a irritação ocular. Este teste tem sido um dos mais criticados pela comunidade
científica, principalmente devido à subjetividade de avaliação das lesões oculares e
variabilidade dos resultados obtidos em diferentes laboratórios, além das questões éticas
com relação ao bem-estar animal. No presente estudo, o ensaio de quantificação de
proteínas totais utilizando o corante Azul Brilhante de Coomassie R-250 foi avaliado
quanto ao seu valor em predizer o potencial de irritação ocular de vinte xampus e cinco
tensoativos. Para este ensaio de citotoxicidade, utilizou-se à linhagem celular derivada
de córnea de coelho (SIRC). A concentração que induziu 50% de inibição do
crescimento celular relativa aos controles (IC50) foi calculada para cada substância-teste.
Os resultados obtidos no teste in vitro foram comparados àqueles obtidos in vivo. A
correlação entre os valores de IC50 obtidos in vitro e os escores máximos do teste in vivo
foi de 0,617 (p=0,003) pelo coeficiente de Pearson e de 0,738 (p=0,000) pelo
coeficiente de Spearman. Para avaliar o grau de preditibilidade do teste in vitro em
relação ao teste de Draize estabeleceu-se um ponto de corte (cut-off) para diferenciação
de substâncias irritantes (IC50<0,700mg/mL) daquelas não-irritantes
(IC50>0,700mg/mL) no teste in vitro. Parâmetros como precisão (96%), sensibilidade
(100%) e especificidade (83%) foram então determinados. Somente um produto
apresentou resultado falso-positivo (irritante in vitro e não-irritante in vivo). Apesar de
haver a necessidade de se testar um maior número de produtos e da realização de
estudos inter-laboratoriais para se acessar a reprodutibilidade desta metodologia; com os
resultados obtidos no presente estudo pode-se dizer que o ensaio de quantificação de
proteínas totais utilizando o corante Azul Brilhante de Coomassie R-250, além de ser
um método com características importantes como rapidez, sensibilidade, simplicidade
de execução, baixo custo e alto grau de automação, foi capaz de predizer o potencial de
irritação ocular de xampus e tensoativos.