Reposicionamento e combinação de fármacos para terapia da doença de Chagas e o potencial impacto de coinfecção helmíntica na infecção por Trypanosoma cruzi

Abstract

A busca por novos tratamentos contra o Trypanosoma cruzi foi abordada utilizando triagem fenotípica de compostos, reposicionamento de fármacos e combinação. O impacto da coinfecção por helmintos foi avaliado no curso da infecção experimental por T. cruzi e na terapia com benznidazol. A atividade tripanossomicida de metronidazol (Mtz), imatinib (IMB) e levamisol (Lms) foi investigada in vitro e in vivo, bem como novos derivados de IMB e inibidores da biossíntese de lipídios. Um modelo experimental de coinfecção para doença de Chagas foi desenvolvido utilizando Schistosoma mansoni. O uso de Mtz até 1000 mg/Kg não teve efeito na supressão da parasitemia de camundongos em comparação com Bz 100 mg/Kg, mas a combinação Bz 10 + Mtz 250 mg/Kg preveniu a mortalidade (70%) e mostrou proteção contra alterações cardíacas desencadeadas por T. cruzi. Estudos in vitro demonstraram que o IMB foi moderadamente ativo contra diferentes cepas e formas de T. cruzi. A combinação IMB + Bz foi aditiva in vitro. Quatorze novos derivados do IMB foram selecionados; a molécula 3e foi tão potente quanto Bz contra T. cruzi, mas apresentou baixo índice de seletividade (IS). Lms (10 - 0,5 mg/Kg) não diminuiu as taxas de parasitemia nem mortalidade no modelo murino de infecção aguda por T. cruzi. Combinação de diferentes doses de Lms + Bz 10 mg/Kg mostrou redução parcial da parasitemia e promoveu a sobrevivência dos animais, o que pode estar relacionado à modulação da resposta imune do hospedeiro. Em relação aos inibidores da biossíntese lipídica, seis dos 15 apresentaram IC50 < 50 \03BCg/mL em epimastigotas. Ensaios em amastigotas intracelulares e células hospedeiras de mamífero mostraram que Ro48-8071 (IS = 13,7) e cloridrato de tomatidina (TH) (IS = 41,2) poderiam ser dirigidos para ensaios combinatórios. Apenas a interação TH + posaconazol (Posa) foi sinérgica (média \03A3FICI = 0,2). Os ensaios in vivo demonstraram ausência de atividade antiparasitária de TH (0,5-5 mg/Kg) na infecção experimental por T. cruzi, enquanto Posa 1,25 e 10 mg/kg parcialmente (80%) e completamente (> 99%) suprimiram a parasitemia, respectivamente, e a dose mais alta atingiu 40% de sobrevida. Observou-se redução parcial da parasitemia (> 60%) e proteção contra mortalidade (> 40%) com THs + Posa 1,25 mg/Kg, sendo a relação 1Posa: 3TH a melhor combinação. Os estudos de coinfecção foram desenvolvidos com a fase aguda experimental do T. cruzi (Tc) frente à esquistossomose nas fases inicial (Sm1) e tardia (Sm2). Parasitemia foi a mesma em Tc e Tc + Sm1; Tc + Sm2 exacerbou a carga parasitária. Alterações cardíacas comuns no Tc foram menos incidentes com a presença do Sm, apresentando menor gravidade, principalmente no Tc + Sm2. Análises histopatológicas revelaram que animais infectados com Tc apresentaram infiltrado mononuclear e ninhos de amastigotas no coração, e camundongos infectados com Sm apresentaram intensa inflamação, granuloma e pigmentos esquistossomóticos no fígado. A detecção de populações de células TCD4 e TCD8 demonstrou que a coinfecção se comportou como a monoinfecção por Tc. O tratamento com Bz apresentou a mesma redução de parasitemia em Tc e ambos Tc + Sm. O tratamento reduziu a inflamação nos tecidos cardíaco e hepático, demonstrado por microscopia de luz. Bz reverteu os eventos inflamatórios em Tc e Tc + Sm1, mas apresentou menor efeito em Tc + Sm2. Triagem fenotípica, reposicionamento de medicamentos e combinação são abordagens validadas para a descoberta de drogas em DC. Além disso, é relevante avaliar as comorbidades em portadores da doença de Chagas, uma vez que podem impactar na condição clínica, no curso do tratamento e na qualidade de vida dos indivíduos afetados.