Dissertação de mestrado
Análise da expressão e do número de cópias gênicas de microrna da região 8q24.21 no câncer gástrico
Fecha
2018-05-24Autor
Pereira, Ana Carolina Anauate [UNIFESP]
Institución
Resumen
Objective: To analyze the expression of miR1204,
miR1205,
miR1206,
miR1207
and miR1208
in neoplastic and nonneoplastic
gastric tissue from patients with and
without GC, determine the reference genes for this analysis, the number of gene copies
of these miRNAs, and to associate these variables with the clinical and pathological
parameters of GC patients. Methods: The expression of miR1204,
miR1205,
miR1206,
miR12075p,
miR12073p,
and miR1208
target miRNA was evaluated by RTqPCR
in 65 paired neoplastic (T) and adjacent nonneoplastic
(A) samples from
patients with GC, and 20 nonneoplastic
gastric tissue samples from cancerfree
individuals submitted to endoscopy (C), and determined by the ΔCt method. The
number of copies of the miR1204,
miR1205,
miR1207,
and miR1208
genes was
determined by qPCR in 69 T samples using the Copy Caller program. Results: The C
group of samples did not differ in relation to gender and age of CG patients (p> 0.05).
Only miR1205
presented different expression between A and C groups, with higher
expression in A group (p = 0.02). Expression of miR1204
and miR1206
was not
observed in the analyzed gastric tissue samples. A strong positive correlation was
observed between miR12075p
and miR1208
expression (p <0.01, ρ = 0.71), and a
very weak positive correlation between miR1205
and miR12073p
expression (p =
0.04, ρ = 0.21). No association was observed between miR1205,
miR12075p,
miR12073p,
and miR1208
expression and the number of copies of their respective genes
(p> 0.05). Increased miR1207
gene copy number was associated with tumors located
in noncardiac
region of the stomach (p = 0.01), and the loss of copies of miR1208
gene was associated with H. pylori infection (p = 0.01). Conclusion: No significant
differences were found between miR1205,
miR12075p,
miR12073p,
and miR1208
expression in T vs A and T vs C samples. However, miR1205
showed an increased
expression in A samples compared to C samples. The results suggest that miR1205
participates in the beginning of GC development. In addition, the absence of
association between these miRNA expressions and the gene copy number indicates
that the change in miR1205
copy number is not the mechanism leading to its
deregulation in the samples tested. Objetivo: Analisar a expressão de miR1204,
miR1205,
miR1206,
miR1207
e miR1208
em tecido gástrico neoplásico e não neoplásico de pacientes com e sem CG,
determinar os genes de referência para essa análise, avaliar o número de cópias
gênicas desses miRNA, e associar estas variáveis com os parâmetros clínicos e
patológicos dos pacientes com CG. Métodos: A expressão dos miRNA alvos miR1204,
miR1205,
miR1206,
miR12075p,
miR12073p,
e miR1208
foi avaliada por
RTqPCR
em 65 pares de amostras neoplásicas (T) e margem adjacente não
neoplásicas (A) de pacientes com CG, e 20 amostras de tecido gástrico não
neoplásica de indivíduos sem câncer submetidos à endoscopia (C), e determinada
pelo método ΔCt. O número de cópias dos genes miR1204,
miR1205,
miR1207,
e
miR1208
foi determinado por qPCR em 69 amostras T e com o uso do programa
Copy Caller. Resultados: O grupo de amostras C não diferiu em relação ao gênero e
idade dos pacientes com CG (p>0,05). Apenas o miR1205
apresentou diferença de
expressão entre os grupos de amostra A e C, com maior expressão no grupo A
(p=0,02). Não foi observada expressão de miR1204
e miR1206
nas amostras de
tecido gástrico analisadas. Foi observada uma correlação positiva e forte entre a
expressão de miR12075p
e miR1208
(p<0,01, ρ=0,71), e uma correlação positiva,
mas fraca, entre a expressão de miR1205
e miR12073p
(p=0,04, ρ=0,21). Não foi
observada associação entre a expressão de miR1205,
miR12075p,
miR12073p,
e
miR1208
e o número de cópias dos seus respectivos genes (p>0,05). O aumento do
número de cópias do gene miR1207
foi associado aos tumores localizados na região
não cárdia do estômago (p=0,01), e a perda do número de cópias do gene miR1208
à presença de infecção por H. pylori (p=0,01). Conclusões: Não foram encontradas
diferenças significantes entre a expressão de miR1205,
miR12075p,
miR12073p,
e miR1208
nas amostras T vs A, e entre T vs C. Porém, o miR1205
apresentou
expressão aumentada nas amostras A em relação às C. Os resultados sugerem que
o miR1205
parece ter um papel importante no início do desenvolvimento do CG. Além
disso, a ausência de associação entre a expressão desses miRNA e o número de
cópias gênicas indica que a alteração do número de cópias do miR1205
não seja o
mecanismo que leva à sua desregulação nas amostras avaliadas.