Dissertação de mestrado
Sinaptogênese hipocampal no modelo experimental de epilepsia induzida por pilocarpina
Fecha
1999Registro en:
São Paulo: [s.n.], 1999. 117 p. ilus., tab.
epm-015892.pdf
Autor
Mori, Mayra [UNIFESP]
Institución
Resumen
A Pilocarpina (PILO), um agonista colinergico muscarinico, administrada em ratos induz crises limbicas e status epilepticus (SE), que dura de 8 a 18 horas (fase aguda). A seguir os animais apresentam uma normalizacao comportamental e eletrografica (fase silenciosa) que dura de 4 a 44 dias; passando posteriormente a apresentar crises espontaneas e recorrentes (fase cronica), ate o final da vida, mimetizando assim, a epilepsia do lobo temporal, observada em seres humanos, Estas crises sao acompanhadas por lesao cerebral e modificacoes neuroquimicas, incluindo aumento da liberacao de algumas monoaminas e aminoacidos no hipocampo. A sinaptofisina (p38) e a mais abundante fosfoproteina associada a vesicula sinaptica. Muitos trabalhos tem demonstrado que esta proteina esta relacionada a liberacao de neurotransmissores e a sinaptogenese porem, pouco se sabe sobre a sua funcao no fenomeno epileptico. Este trabalho tem como objetivo estudar as modificacoes na expressao de p38 em sinaptossomas hipocampais nas fases aguda (l hora de SE); Silenciosa (5 dias) e Cronica (90 dias) do modelo de epilepsia induzido por PILO. Ratos Wistar machos receberam PILO (350 mg/kg) e foram decapitados apos l hora de SE, 5 dias apos SE e 90 dias apos o SE. Um grupo de ratos que recebeu PILO e nao evoluiu para SE tambem foi estudado (parcial). Os hipocampos foram removidos e submetidos a um fracionamento subcelular para obtencao de fracoes enriquecidas de sinaptossomas (Nagy & Delgado-Escueta, 1984). Esta preparacao foi submetida a tecnica de Western blotting, sendo utilizado anticorpo monoclonal contra p38. Realizou-se tambem a imunohistoquimica do hipocampo destes animais com o objetivo de localizar as possiveis alteracoes na expressao desta proteina. A densitometria optica do Western blotting mostrou um aumento de p38 em sinaptossomas hipocampais nas tres fases do modelo, quando comparados aos animais que receberam solucao salina. A imunohistoquimica mostrou que este numero esta concentrado na sub-area de CA3, no giro denteado e no hilo hipocampal. Estes achados neuroquimicos podem contribuir para uma melhor compreensao dos mecanismos de liberacao de neurotransmissores, apos um insulto cerebral, mostrando ainda a ocorrencia de mudancas plasticas permanentes, que podem contribuir para um funcionamento anormal da neurotransmissao hipocampai, durante o fenomeno epileptico