Dissertação de mestrado
Avaliação da expressão de hepcidina e ferroportina na linhagem celular DU145 após tratamento com compostos heparínicos
Fecha
2022-08Autor
Silva, Nathália Kozikas da [UNIFESP]
Institución
Resumen
Introdução: O câncer de próstata é a neoplasia mais frequente e a principal causa de morte nos indivíduos do sexo masculino acometidos, em todo Brasil. Devido à progressão da doença para estágios avançados e que apresentam fenótipo não responsivo ao tratamento tradicional com supressão androgênica, torna-se necessário o desenvolvimento de novas terapias que possam reprimir a progressão tumoral e promover melhor prognóstico aos pacientes. Uma possível estratégia seria alterar moléculas envolvidas em vias que estão alteradas nas células tumorais, como por exemplo a via do metabolismo do ferro. Dados experimentais demonstraram que existe relação significativa entre a maior expressão de hepcidina (hormônio responsável pela diminuição da mobilização de ferro através da degradação da ferroportina) em células de câncer de próstata e o fenótipo mais agressivo da doença. Nesse sentido, inibidores de hepcidina são potenciais alvos na pesquisa de novos agentes terapêuticos capazes de regular o metabolismo de ferro em células tumorais e, dessa forma, conter a progressão tumoral. A heparina e alguns compostos heparínicos têm sido alvo de estudos devido às suas capacidades de agir como promotores da diminuição de hepcidina. Objetivo: Nesse contexto, o principal
objetivo do presente estudo foi investigar o efeito de compostos heparínicos na expressão de hepcidina e ferroportina na linhagem celular DU145, de câncer de próstata. Métodos: Para isso, células da linhagem DU145 foram cultivadas em meio RPMI e submetidas a tratamento de 24 horas com enoxaparina e heparina não fracionada de origens bovina e suína (40μg/mL). As expressões proteicas de hepcidina e ferroportina foram avaliadas através da técnica de Western blotting, enquanto a análise da expressão gênica de hepcidina foi realizada pela técnica de RT-qPCR. Resultados: Não foram encontradas diferenças significativas na expressão das proteínas analisadas na ausência ou presença dos tratamentos realizados, bem como também não foi encontrada diferença na expressão do mRNA de hepcidina. Conclusão: Embora o tratamento com heparina pareça não exercer efeito no metabolismo de ferro na linhagem celular analisada, análises adicionais são necessárias para elucidar os efeitos de compostos heparínicos no metabolismo do ferro para o câncer de próstata. Introduction: Prostate cancer is the most frequent neoplasm and the leading
cause of death due to cancer in males all over Brazil. Because the disease
progresses to advanced stages, which present a phenotype that is unresponsive
to the traditional treatment with androgen suppression, it is topical to develop new
therapies that are able to suppress tumor progression and promote a better
prognosis for patients. A possible strategy is to modify one of the pathways tumor
cells use to guarantee higher success in tumor survival, such as the iron
metabolism pathway. Hepcidin is a hormone that is responsible for decreasing
iron mobilization through ferroportin degradation. Experimental data
demonstrated a significant relationship between higher hepcidin expression in
prostate cancer cells and the most aggressive phenotype of the disease. Thus,
hepcidin inhibitors are potential targets in the research for new therapeutic agents
that can regulate iron metabolism in tumor cells, hence, halting tumor
progression. Heparin and some heparin compounds have been studied due to
their properties of hepcidin reduction. Objective: In this context, the main
objective of this study was to investigate the effect of heparin compounds on the
expression of hepcidin and ferroportin in the prostate cancer cell line DU145.
Methos: For that, DU145 cells were cultured in an RPMI medium and treated
with enoxaparin or unfractionated heparin of bovine or porcine origin (40µg/mL)
for 24h. Hepcidin and ferroportin protein expression were assessed by Western
Blotting, whereas hepcidin gene expression analysis was performed by the RTqPCR technique. Results: No statistically significant differences were found in
the expression of the analyzed proteins in the absence or presence of the
treatments performed. Conclusion: Moreover, no difference was found in
hepcidin mRNA expression. Although heparin treatment seems not to impact iron
metabolism in the analyzed cell line, additional studies are necessary to elucidate
the effects of heparin compounds on iron metabolism in prostate cancer.