Expressão de genes relacionados às subpopulações de linfócitos T regulatórios, linfócitos Th17 e antígenos câncer

Abstract

Os mecanismos biologicos envolvidos na fisiopatogenese do mieloma multiplo (MM) englobam uma serie de alteracoes geneticas do tumor e alteracoes no microambiente da medula ossea (MO) favorecendo o crescimento da neoplasia e a falha do sistema imunologico no controle deste crescimento. Os linfocitos T regulatorios (Treg) desempenham um papel importante na manutencao da auto tolerancia e modulacao de respostas imunologicas para controle de infeccoes e proliferacao de celulas tumorais. Os linfocitos Th17 tem uma funcao importante na erradicacao de patogenos extracelulares e celulas tumorais. Portanto, o equilibrio entre Treg e celulas Th17 parece ser essencial para a manutencao da homeostase de imunidade antitumoral. Os antigenos cancer/testiculo (CTs) sao assim denominados, pois suas proteinas foram identificadas nas celulas germinativas dos testiculos e em celulas trofoblasticas da placenta. Exceto por essas duas localizacoes, os CTs encontram-se geralmente silenciados em tecidos normais. Devido a sua expressao restrita as celulas neoplasicas e a sua capacidade de induzir resposta imunologica antitumoral, os CTs vem se mostrando alvos terapeuticos interessantes em cancer. Neste cenario, o objetivo do presente estudo foi caracterizar a expressao de genes relacionados as subpopulacoes de linfocitos Treg e Th17 em mieloma multiplo para compreender o seu potencial como biomarcadores, fatores prognosticos e alvos terapeuticos na doenca, bem como observar uma possivel correlacao com expressao de CTs. Material e Metodos: A expressao dos genes CTLA4 e RORγt, respectivamente associados aos linfocitos Treg e Th17, foi determinada por PCR quantitativo em tempo real (qPCR) em aspirados de MO de 46 pacientes com MM recem-diagnosticados, 05 pacientes com plasmocitomas solitarios (PS) recem-diagnosticados, 04 pacientes com gamopatia monoclonal de significado indeterminado (GMSI) e 06 controles sadios (doadores de transplante alogenico). Os genes foram considerados hiperexpressos quando os resultados mostraram valores pelo menos 2 vezes mais elevados do que em amostras normais. A expressao dos CTs mais frequentemente expressos em MM [MAGEC1(CT-7), MAGEA3/6, NY-ESO-1, LAGE-1 e GAGE] foi analisada por RT-PCR convencional nas mesmas amostras de medula ossea total. Resultados: O gene CTLA4 foi considerado hiperexpresso em 72% dos casos de MM. A expressao de CTLA-4 observada em pacientes com MM foi quase 15 vezes maior em comparacao aos controles normais (p=0,03; Mann-Whitney). A razao entre a expressao dos genes CTLA4/RORyt foi significativamente maior em amostras de pacientes com MM do que nos controles normais (p = 0,009; Mann-Whitney). Porem nao foi observado impacto do aumento de expressao dos genes relacionados aos linfocitos Treg na sobrevida global dos pacientes com MM. Confirmamos a alta expressao de MAGEC1/CT7 (66%) em MM, mas nao parece haver correlacao entres as expressoes de genes relacionados aos linfocitos Treg e Th17 e os CTs aqui estudados. Conclusoes: A hiperexpressao de CTLA4 em > 70% dos casos MM sugere um acumulo de linfocitos Tregs imunossupressores no microambiente tumoral e/ou um envolvimento imediato deste gene no desenvolvimento e progressao de MM (aumento da razao CTLA4/RORyt em MM quando comparado a PS/GMSI ou individuos normais). Desse modo, as abordagens terapeuticas que tem o CTLA4 como alvo, podem figurar como possiveis estrategias ao tratamento do MM