Propriedades de fibroblastos transformados com o oncogene EJ-ras: interações com componentes da matriz extracelular

Abstract

A transformacao maligna induzida pelo oncogene EJ-ras e caracterizada por uma serie de alteracoes em carboidratos de superficie celular e interacoes celula-celula e celula-matriz. Aqui, nos mostramos que fibroblastos NIH 3T3 transformados com EJ-ras adquirem um fenotipo migratorio em superficies sensibilizadas com laminina-1. Tal fenotipo foi acompanhado pela super-expressao de: (a) α6β1 funcional, mas nao outras β1-integrinas ligantes de laminina; e (b) glicoconjugados na superficie celular contendo grandes oligossacaridios reconhecidos por leucoaglutinina de Phaseolus vulgaris ( L-PHA ). O opoolo interno de pre-β1-integrinas foi diferentemente regulado nas celulas transformadas com EJ-ras comparado com os fibroblastos nao transfectados. A conversao das pre-β1 para as β1-integrinas maduras foi mais rapida nas celulas transformadas com EJ-ras, um processo associado a super-expressao da cadeia α6. A super-expressao de oligossacaridios L-PHA-reativos e dependente da atividade da N-acetilglucosaminiltransferase V, que e induzida em celulas transformadas. Nos mostramos que β1-integrinas foram os principais carregadores de oligossacaridios L-PHA-reativos na superficie celular. Este padrao de glicosilacao, entretanto, nao foi necessario para a expressao na superficie celular de β1-integrinas nem para sua atividade funcional na resposta migratoria a laminina-1. Estes dados estao de acordo com a ausencia de atividade inibitoria de sacaridios na migracao de fibroblastos transformados em laminina. Alem disso, fibroblastos transformados com EJ-ras agregam espontaneamente. Estes efeitos nao foram observados em fibroblastos transfectados com c-jun, que sao incapazes de migrar em laminina, nao super-expressam β1-integrinas nem oligosacaridios L-PHA-reativos, e nao agregam. Os resultados obtidos sugerem que a migracao de fibroblastos transformados com ras em laminina e mediada por α6β1 integrina e que os sitios de interacao da integrina, bem como da laminina, provavelmente envolvem determinantes peptidicos