Estudo da expressão gênica, na via de apoptose, do melanoma de camundongos prenhes tratadas com Viscum album

Abstract

Objetivo: Avaliar as expressoes de genes das vias da apoptose, no melanoma de camundongos prenhes ou nao, tratadas com Viscum album. Metodos: Implantaram-se celulas tumorais de melanoma em seis grupos de camundongos femeas, a saber: Grupo 1. nao gravidas; 2. gravidas; 3. Nao gravidas tratadas com placebo; 4. nao gravidas tratadas com Viscum album; 5. gravidas tratadas com placebo e 6. gravidas tratadas com Viscum album. Os grupos tratados receberam a medicacao injetavel durante os 19 dias da gestacao. A exerese da lesao ocorreu no dia do sacrificio (19º dia da gravidez) e o material ressecado foi armazenado em nitrogenio liquido. Posteriormente se extraiu o RNA e, entao foi gerado o cDNA complementar. Com esse material foi possivel a pesquisa das expressoes das vias da apoptose, por meio da tecnologia de PCR array. Resultados: Observou-se a expressao diferencial, entre os grupos 1 e 2 (efeito da gravidez), dos genes antiapoptoticos: Api-5, Bcl-2L1, Birc2, Birc3 e Tsc22d3; pro-apoptoticos: caspase-7 e 9; de dominio de morte: RIPK-1; do gene da familia Traf: Traf-3. Notou-se, ainda, hipoexpressoes dos genes indutores de morte BAD e FADD; antiapoptoticos: IL-10; familia dominio Card: Card 10, Nod-1, Nol-3; familia de dominio Cideb e DFFb e, ainda, TNFsf-10, Traf-1 e Traf-2. A avaliacao da expressao diferencial, entre os grupos 3 e 4 (efeito da droga), mostrou hiperexpressoes dos genes antiapoptoticos: Xiap e Dad-1; genes indutores de apoptose: Caspase-7 e Trp53bp2; e os genes Card-10, Nod-1, Caspase-8, Cidea, DFFb, Nol-3, TNFsf10, Traf1 e Traf-2. Na analise do efeito da droga associada a gestacao, a expressao diferencial dos genes entre os grupos 5 e 6 mostraram hiperexpressoes dos genes indutores de apoptose: Apaf-1, BAX e BID; antiapoptoticos: Bag-1, Bcl-2 e Bcl-2L-1; e os genes AKT-1, Caspase-8 e DFFa. Conclusoes: A influencia da gravidez sob o melanoma apresenta tendencia antiapoptotica. O tratamento com Viscum album, no grupo nao gravida, ativou a via das caspases favorecendo a apoptose. No grupo gravida tratado com Viscum album houve hiperexpressao do gene DFFa que denota fragmentacao do DNA. Dessa forma houve acionamento do mecanismo de apoptose atraves de via alternativa, ou seja, nao ativou a via das caspases, porem acarretou a apoptose por provavel acao na via intrinseca