Trabalho de conclusão de curso de graduação
Análise cromossômica em lagartos sexuados e partenogenéticos do gênero Loxopholis (Squamata: Gymnophthalmidae), com ênfase no complexo L. percarinatum e L. ferreirai de municípios do Rio Negro, Amazônia
Fecha
2022-01-28Autor
Goes, Gabriela Farias de [UNIFESP]
Institución
Resumen
O complexo de espécies Loxopholis percarinatum reúne lagartos pequenos partenogenéticos diploides e triploides e espécies sexuadas novas ainda não descritas que ocupam o folhiço das florestas neotropicais da América do Sul. A abordagem citogenética é bastante adequada para a caracterização de diferenças em níveis de ploidia, bem como no entendimento da origem da partenogênese e dos potenciais parentais envolvidos na hibridização. Um estudo molecular recente demonstrou que o ancestral paterno de L. percarinatum 2n seria o ancestral de L. ferreirai, espécie também endêmica da região do Rio Negro e que ocorre em florestas de Igapó. O presente estudo teve como objetivo principal determinar a ploidia de indivíduos do complexo Loxopholis percarinatum, incluindo fêmeas unissexuais e os bissexuais parentais de localidades ao longo do Rio Negro na Amazônia brasileira. Adicionalmente, investigou-se os cariótipos de L. ferreirai de novas localidades da região do médio Rio Negro para além da área de endemismo da espécie. As preparações cromossômicas obtidas diretamente do epitélio do intestino e testículos foram analisadas em coloração convencional e diferencial (AgNO3 e bandas C). De um total de 46 fêmeas partenogenéticas analisadas, foi confirmada a ploidia de 20 em 10 novas localidades. Cerca de 85% das fêmeas apresentaram cariótipo com 3n=66 (30 macrocromossomos - M + 36 microcromossomos - m) em Rorainópolis-RR, Barcelos e Santa Isabel do Rio Negro (AM). A diferença na morfologia dos três primeiros (M) dos cariótipos 3N reforça a origem híbrida dessas fêmeas uni-3N. Em 15% das fêmeas, foi observado cariótipo 2n=44 (20M+24m) em Novo Airão-AM e na localidade-tipo Peixe-Boi-PA. Fêmeas uni-2N possuem Ag-RONs em par de (m), enquanto as uni-3N mostraram marcação da RON em um único (m), sugerindo possível expressão uniparental de genes. Os machos da nova espécie bissexuada exibiram células meióticas compatíveis com o cariótipo de 2n=44 (20M+24m). Em L. ferreirai foi observado o cariótipo 2n=44 (20M+24m) e presença de RONs heteromórficas em um par de (m), além de bandas C positivas fracamente marcadas em regiões pericentroméricas e teloméricas. Não foram observados cromossomos sexuais diferenciados em nenhum dos cariótipos. Nossos achados indicam que a citogenética é uma abordagem importante para a identificação do limite das espécies unissexuais do complexo L. percarinatum com diferentes níveis de ploidia. Loxopholis percarinatum is a species complex of small parthenogenetic diploid and triploid lizards, as well as new undescribed sexual species, that inhabit the litter of South American neotropical forests. Cytogenetic analysis is highly suited for determining changes in ploidy levels, as well as for deciphering the origins of parthenogenesis and the parental potentials involved in hybridization. A recent molecular study indicated that the paternal ancestor of L. percarinatum 2n was L. ferreirai, another endemic species of the Rio Negro region found in Igapó forests. The primary goal of this study was to determine the ploidy of individuals belonging to the L. percarinatum complex including unisexual females and the bisexual parents from localities all over Rio Negro in the Brazilian Amazon. Additionally, the karyotypes of L. ferreirai were studied from new localities in the middle Rio Negro region. Far from the endemism area of the species. Using standard and differential staining, chromosomal preparations produced directly from intestine and testis cells were examined (AgNO3 and C-bands). The ploidy of 20 females in ten new locations was validated using a total of 46 parthenogenetic females analyzed. In Rorainópolis-RR, Barcelos, and Santa Isabel do Rio Negro, over 85% of females had a karyotype of 3n=66 (30 macrochromosomes (M) + 36 microchromosomes (m) (AM). The morphology of the first three (M) of the 3N karyotypes indicates that these uni- 3N females are hybrids. In 15% of females in Novo Airão-AM and the type locality Peixe-Boi-PA, karyotype 2n=44 (20M+24m) was observed. Uni-2N females have Ag-NORs on two (m), whereas uni-3N females have NORs on a single (m), implying probable uniparental gene expression. Males of the new bisexual species possessed meiotic cells consistent with the 2n=44 (20M+24m) karyotype. The karyotype 2n=44 (20M+24m) was detected in L. ferreirai, as well as heteromorphic NORs in a pair of (m), as well as faintly positive C-bands in pericentromeric and telomeric regions. No heteromorphic sex chromosomes were observed. Our findings indicate that cytogenetics is a critical tool for determining species limits of unisexual species of the L. percarinatum complex with different ploidy levels.