Artículo
LED fluorescence microscopy in the diagnosis of tuberculosis: Fading and restaining of smears for external quality assessment
Registro en:
0325-7541
10.1016/j.ram.2016.03.006
Autor
Allassia, Sonia
Aranibar, Mónica
Boutonnet, Mónica
Caserío, Viviana
Etchart, Ana Alicia
Fajardo, Sandra
García, Mónica
Gomez, Noemí
Gunia, Alba Marisa
Gustincic, María Virginia
Izquierdo, Viviana
Jara, Arnaldo Andrés
Kozicky, Graciela
Matteo, Mario
Pellegrini, Carlos
Pellegrino, Silvia
Pérez Catalán, Sebastián
Poggi, Susana
Sacramone, Carina
Santiso, Gabriela María
Souto, Alejandro
Togneri, Ana María
Wolff, Lidia
Vilche, Sandra
Eletti, Daniel
Imaz, María Susana
Resumen
Fil: Allassia, Sonia. Dirección de Bioquímica de la Municipalidad de Rosario, Rosario, Santa Fe; Argentina. Fil: Aranibar, Mónica. Hospital San Roque. Laboratorio de Tuberculosis, San Salvador de Jujuy, Jujuy; Argentina. Fil: Boutonnet, Mónica. Dirección de Bioquímica de la Municipalidad de Rosario, Rosario, Santa Fe; Argentina. Fil: Caserío, Viviana. Dirección de Bioquímica de la Municipalidad de Rosario, Rosario, Santa Fe; Argentina. Fil: Etchart, Ana Alicia. Hospital San Roque. Laboratorio de Tuberculosis, San Salvador de Jujuy, Jujuy; Argentina. Fil: Fajardo, Sandra. Dirección de Bioquímica de la Municipalidad de Rosario, Rosario, Santa Fe; Argentina. Fil: García, Mónica. Hospital de Infecciosas Francisco Javier Muñiz. Laboratorio de Tuberculosis, Ciudad Autónoma de Buenos Aires; Argentina. Fil: Gomez, Noemí. Laboratorio Central de Salud Pública. Laboratorio de Tuberculosis, Resistencia, Chaco; Argentina. Fil: Gunia, Alba Marisa. Laboratorio Central de Salud Pública. Laboratorio de Tuberculosis, Resistencia, Chaco; Argentina. Fil: Gustincic, María Virginia. Hospital Interzonal General de Agudos Evita. Laboratorio de Bacteriología, Lanús, Buenos Aires; Argentina. Fil: Izquierdo, Viviana. Hospital San Roque. Laboratorio de Tuberculosis, San Salvador de Jujuy, Jujuy; Argentina. Fil: Jara, Arnaldo Andrés. Laboratorio Central de Salud Pública. Laboratorio de Tuberculosis, Resistencia, Chaco; Argentina. Fil: Kozicky, Graciela. Dirección de Bioquímica de la Municipalidad de Rosario, Rosario, Santa Fe; Argentina. Fil: Matteo, Mario. Hospital de Infecciosas Francisco Javier Muñiz. Laboratorio de Tuberculosis, Ciudad Autónoma de Buenos Aires; Argentina. Fil: Pellegrini, Carlos. Dirección de Bioquímica de la Municipalidad de Rosario, Rosario, Santa Fe; Argentina. Fil: Pellegrino, Silvia. Laboratorio Central de Salud Pública. Laboratorio de Tuberculosis, Resistencia, Chaco; Argentina. Fil: Pérez Catalán, Sebastián. Hospital Interzonal General de Agudos Evita. Laboratorio de Bacteriología, Lanús, Buenos Aires; Argentina. Fil: Poggi, Susana. Hospital de Infecciosas Francisco Javier Muñiz. Laboratorio de Tuberculosis, Ciudad Autónoma de Buenos Aires; Argentina. Fil: Sacramone, Carina. Laboratorio Central de Salud Pública. Laboratorio de Tuberculosis, Resistencia, Chaco; Argentina. Fil: Santiso, Gabriela María. Hospital Interzonal General de Agudos Evita. Laboratorio de Bacteriología, Lanús, Buenos Aires; Argentina. Fil: Souto, Alejandro. Hospital de Infecciosas Francisco Javier Muñiz. Laboratorio de Tuberculosis, Ciudad Autónoma de Buenos Aires; Argentina. Fil: Togneri, Ana María. Hospital Interzonal General de Agudos Evita. Laboratorio de Bacteriología, Lanús, Buenos Aires; Argentina. Fil: Wolff, Lidia. Hospital Rawson. Laboratorio de Bacteriología, Córdoba; Argentina. Fil: Vilche, Sandra. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias. Departamento de Diagnóstico y Referencia; Argentina. Fil: Eletti, Daniel. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias. Departamento de Diagnóstico y Referencia; Argentina.a. Fil: Imaz, María Susana. ANLIS Dr.C.G.Malbrán. Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias. Departamento de Diagnóstico y Referencia; Argentina. Blinded rechecking is a method proposed for external quality assurance (EQA) of auramine-stained acid-fast bacilli (AFB) smears using fluorescence microscopy (FM), however, this procedure is not well developed and slides fading over time could compromise its implementation. Since bleaching of fluorescent molecules involves temperature-dependent chemical reactions, it is likely that low temperatures could slow down this process. We stored auramine-stained slides under different environmental conditions, including -20°C, and examined them over time. The slides stored in all the environments faded. At -20°C, fading was not reduced in relation to room temperature. Restaining and re-examining smears after five months showed that the slides containing saliva and storage at -20°C were associated with failure in AFB reappearance. In conclusion, the practice of freezing slides until they are viewed should be discouraged as it has a negative effect on blinded rechecking by reducing reading concordance after restaining. Specimen quality should be considered when interpreting FM-EQA results.