| dc.contributor | Cadavid Jaramillo, Ángela Patricia | |
| dc.contributor | Rua Molina, Carolina | |
| dc.creator | Álvarez Jaramillo, Daniel | |
| dc.date | 2022-06-15T13:49:55Z | |
| dc.date | 2022-06-15T13:49:55Z | |
| dc.date | 2022 | |
| dc.date.accessioned | 2023-08-28T20:50:55Z | |
| dc.date.available | 2023-08-28T20:50:55Z | |
| dc.identifier | http://hdl.handle.net/10495/29227 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8485113 | |
| dc.description | RESUMEN: El síndrome antifosfolípido es una trombofilia adquirida causada por un grupo heterogéneo de autoanticuerpos dirigidos principalmente contra proteínas de unión a fosfolípidos (anticuerpos antifosfolípidos - aAFL). Paradójicamente, algunos de estos anticuerpos se comportan in vitro como inhibidores de la cascada de la coagulación, un fenómeno denominado "anticoagulante lúpico". Entre los múltiples mecanismos patogénicos asociados al síndrome antifosfolípido, se ha descrito que los aAFL inducen la activación y disfunción del endotelio vascular a través de vías de señalización que involucran las proteínas quinasas activadas por mitógenos (MAPK). Así mismo, se sabe que los aAFL inducen en células endoteliales la liberación de vesículas extracelulares medianas y grandes (VEm/g), fragmentos de membrana con presumibles propiedades procoagulantes. En este trabajo abordamos la actividad de coagulación de las VEm/g endoteliales liberadas ante el estímulo con aAFL y su principal cofactor, la proteína plasmática β2 glicoproteína I. Exploramos cómo las vías de las MAPK están implicadas en la liberación de las VEm/g y en su carácter procoagulante, y cómo los anticuerpos tipo anticoagulante lúpico interactúan con estas estructuras para modificar su actividad de coagulación directa. Con esta finalidad, fue empleado un modelo in vitro de endotelio estimulado con inmunoglobulinas G de mujeres con diferentes manifestaciones clínicas del síndrome antifosfolípido y de grupos control, se realizó identificación de vesículas extracelulares por citometría de flujo, y fue implementado un ensayo de coagulación basado en plasma recalcificado. Nuestros resultados muestran que la actividad de coagulación de las VEm/g liberadas a causa del estímulo con aAFL se encuentra condicionada por la actividad tipo anticoagulante lúpico de estos autoanticuerpos. Este efecto anticoagulante se ve revertido al usar β2 glicoproteína I durante la estimulación de las células endoteliales, lo cual recupera la actividad de coagulación de las VEm/g de una forma dependiente de las MAPK quinasas de especificidad dual 1 y 2 (MEK1/2). En resumen, nuestros hallazgos sugieren que la β2 glicoproteína I es suficiente para revertir, más no para sobrepasar, el efecto anticoagulante que anticuerpos tipo anticoagulante lúpico ejercen sobre las VEm/g endoteliales. Así, las VEm/g no parecen constituir un factor procoagulante directo en el síndrome antifosfolípido, aunque su relación con otros mecanismos indirectos aún debe ser explorada. | |
| dc.description | ABSTRACT: Antiphospholipid syndrome is an acquired thrombophilia driven by a heterogeneous group of autoantibodies primarily targeting phospholipid-binding proteins (antiphospholipid antibodies - aPL). Paradoxically, some of these antibodies behave in vitro as inhibitors of the coagulation cascade, a phenomenon referred to as “lupus anticoagulant”. Among the multiple pathogenic mechanisms involved in antiphospholipid syndrome, aPL have been described to induce activation/dysfunction of vascular endothelium through signalling pathways such as the mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathways. Likewise, aPL are known to induce the release of endothelial cell-derived medium/large extracellular vesicles (EDEVs), which are membrane fragments with putative procoagulant properties. This work addresses the coagulation activity of EDEVs released upon stimulation with aPL and its primary cofactor, β2 glycoprotein I. We attempted to explore how MAPK pathways are involved in the release of EDEVs and their coagulation properties; and how lupus anticoagulant-like antibodies interact with EDEVs to modify their coagulation properties. For this purpose, an in vitro model of immunoglobulin G-stimulated endothelium, flow cytometry of extracellular vesicles, and a recalcified plasma-based assay were employed. Our results show that the coagulation activity of EDEVs released upon stimulation with aPL is conditioned by the lupus anticoagulant-like activity of autoantibodies. This anticoagulant effect is abrogated by using β2 glycoprotein I during endothelial cell stimulation, which restores the coagulation activity of EDEVs in mitogen-activated protein kinase kinases 1 and 2 (MEK1/2)-dependent manner. In summary, our findings suggest that β2 glycoprotein I is sufficient to abrogate, but not to surpass, the anticoagulant effect that lupus anticoagulant-like antibodies exert on EDEVs. Thus, EDEVs does
not seem to pose a direct procoagulant factor in antiphospholipid syndrome, although their relationship with other indirect mechanisms remains to be explored. | |
| dc.format | 37 | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.language | spa | |
| dc.publisher | Grupo Reproducción | |
| dc.publisher | Medellín - Colombia | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.rights | http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/ | |
| dc.rights | http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 | |
| dc.rights | https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/ | |
| dc.subject | Trombosis | |
| dc.subject | Vesículas extracelulares | |
| dc.subject | Anticuerpos antifosfolípidos | |
| dc.subject | Inhibidor de coagulación del lupus | |
| dc.subject | Proteínas quinasas activadas por mitógenos | |
| dc.subject | Extracellular vesicles | |
| dc.subject | Antibodies, antiphospholipid | |
| dc.subject | Lupus coagulation inhibitor | |
| dc.subject | Mitogen-activated protein kinases | |
| dc.subject | Thrombosis | |
| dc.subject | http://id.nlm.nih.gov/mesh/D000067128 | |
| dc.subject | https://id.nlm.nih.gov/mesh/D017152 | |
| dc.subject | https://id.nlm.nih.gov/mesh/D016682 | |
| dc.subject | https://id.nlm.nih.gov/mesh/D020928 | |
| dc.subject | https://id.nlm.nih.gov/mesh/D013927 | |
| dc.title | Vesículas extracelulares endoteliales, anticuerpos antifosfolípidos, y vías de las proteínas quinasas activadas por mitógenos: Un nuevo abordaje del fenómeno anticoagulante lúpico | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/masterThesis | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/submittedVersion | |
| dc.type | http://purl.org/coar/resource_type/c_bdcc | |
| dc.type | https://purl.org/redcol/resource_type/TM | |
| dc.type | Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestría | |
