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Fecal culture and two fecal-PCR methods for the diagnosis of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in a seropositive herd
Cultivo fecal y dos metodos de PCR en materia fecal para el diagnostico de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis en un hato seropositivo
Registro en:
Correa NM, Ramírez NF, Bülte M, Fernández JA. Fecal culture and two fecal-PCR methods for the diagnosis of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in a seropositive herd. Rev Colomb Cienc Pecu. 2017; 30:101-115.
0120-0690
10.17533/udea.rccp.v30n2a02
2256-2958
Autor
Correa Valencia, Nathalia María del Pilar
Ramírez Vásquez, Nicolás Fernando
Bulte, Michael
Fernández Silva, Jorge Arturo
Institución
Resumen
ABSTRACT: paratuberculosis is a slow-developing infectious disease, characterized by chronic
granulomatous enterocolitis. This disease has a variable incubation period from 6 months to over 15 years,
and is caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP). Its detection by direct and indirect
diagnostic techniques has been of special interest. Objective: to report the diagnosis and detection of MAP
using several diagnostic testsin a herd of the Northern region ofAntioquia, Colombia. Methods:serum samples
from the study herd were analyzed, using a commercial ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) kit.
Fecalsamples were cultured by duplicate using Herrold ́s egg yolk medium (HEYM), and analyzed by an end-
point IS900-specific nested PCR protocol, and a commercial F57-real-time PCR kit. Results: eight out of 27
serum samples in the study herd resulted ELISA-positive. None of fecal samples resulted positive to HEYM
culture by duplicate and none were found to be positive by F57-real-time PCR. Were found to be positive by end-point IS900-specific nested PCR.Agreement was found between ELISA and end-point IS900-specific nested PCR in one of the animals. Conclusion: the present study gives information about the agreement between direct and indirect MAP-detection techniques, using different matrixes from animals under the same husbandry conditions. RESUMEN: la paratuberculosis es una enfermedad infecciosa de desarrollo lento, caracterizada por una enterocolitis granulomatosa crónica. Esta enfermedad tiene un periodo de incubación que varía entre los 6 meses hasta por más de 15 años, y es causada por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP). Su detección por técnicas diagnósticas directas e indirectas ha sido de interés especial. Objetivo: reportar el diagnóstico y detección de MAP utilizando varias técnicas diagnósticas en un hato de la región norte de Antioquia, Colombia. Métodos: se analizaron las muestras de suero del hato de estudio utilizando un kit comercial de ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Las muestras de materia fecal fueron cultivadas por duplicado en Herrold´s egg yolk medium (HEYM), y analizadas mediante un protocolo de PCR anidado específico de IS900 y un kit comercial de PCR en tiempo real para F57. Resultados: ocho de las 27 muestras de suero resultaron positivas por ELISA. Ninguna de las muestras de materia fecal resultó positiva al cultivo en HEYM por duplicado ni por PCR en tiempo real para F57. Siete de las 27 muestras de materia fecal resultaron positivas a PCR anidado específico de IS900. Se encontró concordancia entre el resultado de ELISA y de PCR anidado específico de IS900 en uno de los animales. Conclusión: el presente estudio brinda información acerca de la concordancia entre técnicas directas e indirectas de detección de MAP, utilizando diferentes matrices a partir de animales bajo las mismas condiciones de manejo COL0001262