Trabajo de grado - Pregrado
Micropropagaci?n in vitro de cactus cola de rata Aporocactus flagelliformis L
Registration in:
T 0701 233 CD3222
CD3222
Author
Rocha Caicedo, Mar?a M?nica
Institutions
Abstract
58 P?ginas. Recurso Electr?nico Aporocactus flagelliformis L, es un cactus epif?tico perteneciente a la familia Cactaceae, proveniente del norte de M?xico. Puede encontrarse tanto en zonas des?rticas como semides?rticas, soportando temperaturas extremas, es de uso potencial en la industria medicinal, en el forrajeo, en la industria cosmetol?gica, entre otras. Dentro del diario oficial de la federaci?n Mexicana est? considerada como una especie end?mica; es atractiva a nivel ornamental por su forma de crecimiento, consistencia y belleza de sus flores. La dificultad en la adquisici?n de sus semillas y su alto costo condujo a la implementaci?n de t?cnicas de cultivo de tejidos in vitro para una propagaci?n m?s eficiente.
En este proyecto se plantearon protocolos que permitieron el establecimiento del cultivo in vitro de la especie. Se evalu? el tipo de explante, agentes desinfectantes, antioxidantes y reguladores de crecimiento vegetal. Cortes transversales del domo apical central de tallo, con longitud mayor a 1 cm sin espinas, fue seleccionado como el explante ?ptimo para la propagaci?n; para control de la contaminaci?n se seleccion? una mezcla de yodo + antif?ngico (Benomil, 3 gr/500 ml) en la etapa de acondicionamiento de plantas madres y el dicloruro de mercurio (HgCl2) al 0,2 % por 20 minutos, en la c?mara de flujo laminar. Como medio de cultivo se recomienda el MS b?sico, adicionado con 3 gr/L de carb?n activado, BAP 3ml/L y ANA 1 ml/L. Con este protocolo se logr? el control de la contaminaci?n, la reducci?n en el porcentaje de oxidaci?n de explantes, el establecimiento y propagaci?n in vitro de A. flagelliformis L mediante organog?nesis directa. ABSTRACT. Aporocactus flagelliformis L, is a cactus owned to the family Cactaceae, from northern M?xico. It can be found both desert as semi-desert areas, withstanding extreme temperatures, is of potential use in the medical industry, the foraging, in the cosmetics industry, inter alia. Within the official journal of the Mexican federation is considered as a specie endemic; is attractive at level ornamental by his form of growth, consistency and beauty of its flowers; the difficulty in the acquisition of seeds and its high cost, make necessary the implementation of techniques of cultivation in vitro for a propagation more efficient.
In this project were raised protocols which allowed the establishment of cultivation in vitro of the specie. Was evaluated the kind of explant, disinfectant agents, antioxidants and growth regulators. cross sections of dome central apical of stalk, with length higher of 1 cm boneless, was selected as the explant optimal for the propagation; for the control of the contamination, we selected a mixture of iodine + antifungal (Benomyl, 3 gr/500 ml) in the phase of conditioning of Mother plants and the mercury dichloride (HgCl2) to 0.2% for 20 minutes in the laminar flow chamber. was used as culture medium basic MS, suplemented with 3g/L of activated charcoal, 3 ml/L of benzyl aminopurine (BAP) and naphthaleneacetic acid 1ml/L. With this protocol was achieved the control of the contamination, the reduction in the percent of oxidation of explants, the establishment and propagation in vitro of A. flagelliformis L by direct organogenesis. ADVERTENCIA. La Facultad de Ciencias de la Universidad del Tolima, el director del trabajo y el jurado calificador, no son responsables de los conceptos ni de las ideas expuestas por el autor del presente trabajo. Art?culo 16, Acuerdo 032 de 1976 y Art?culo 29, acuerdo 064 de 1991, Consejo Acad?mico de la Universidad del Tolima. INTRODUCCI?N 14
1. OBJETIVOS 16
1.1 GENERAL 16
1.2 ESPECIFICOS 16
2. MARCO REFERENCIAL 17
2.1 ANTECEDENTES 17
2.1.1 Familia Cactaceae 17
2.2 MARCO TEORICO 18
2.2.1 Caracter?sticas de familia Cactaceae 18
2.2.1.1 Origen y evoluci?n 18
2.2.1.2 Distribuci?n de las Cact?ceas 18
2.2.1.3 Clasificaci?n Bot?nica 18
2.2.1.4 Morfolog?a de las Cact?ceas 19
2.2.1.5 Fisiolog?a de las Cact?ceas 22
2.2.1.6 M?todos de propagaci?n 23
2.2.1.7 Amenaza y conservaci?n 24
2.3 DESCRIPCI?N DE LA ESPECIE EN ESTUDIO 24
2.3.1 Aporocactus flagelliformis L 24
2.3.1.1 Clasificaci?n 24
2.3.1.2 Descripci?n morfol?gica 25
2.3.1.3 Distribuci?n en M?xico 26
2.3.1.4 propagaci?n de A. flagelliformis L 26
2.3.1.5 Conservaci?n y factores de riesgo 26
2.4 CULTIVO in vitro DE TEJIDOS VEGETALES 27
2.4.1 etapas del cultivo in vitro 27
2.4.2 Medios de cultivo 28
2.5 CULTIVO in vitro DE CACTACEAS 28
2.5.1 Medios de cultivo y fitohormonas en Cact?ceas 28
2.5.2 Origen y tipos de explantes de la familia Cactaceae 29
2.5.3 Inducci?n de callo en la familia Cactaceae 29
2.5.4 Ventajas del cultivo in vitro en Cact?ceas 30
2.5.5 Factores que afectan el cultivo in vitro de Cact?ceas 30
3. METODOLOGIA 32
3.1 AREA DE ESTUDIO 32
3.2 DESCRIPCI?N DEL ENSAYO 32
3.2.1 Etapa 0 32
3.2.2 Etapa I 32
3.2.3 Obtenci?n de explantes 32
3.2.3.1 Monitoreo de desinfecci?n 33
3.2.3.2 Control de la oxidaci?n 33
3.2.3 Etapa II 35
3.2.3.1 Evaluaci?n de reguladores de crecimiento 35
3.3 ANALISIS ESTAD?STICO 36
4. RESULTDOS Y DISCUSI?N 37
4.1 ETAPAI 37
4.1.1 Obtenci?n de explantes de A. flagelliformis 37
4.1.2 Monitoreo de la desinfecci?n 38
4.1.3 Control de la oxidaci?n 39
4.2 ETAPA II 41
5. CONCLUSIONES 45
6. RECOMENDACIONES 46
REFERENCIAS 47
ANEXOS 52