Trabajo de grado - Pregrado
Caracterizaci?n y evaluaci?n del potencial biol?gico del veneno de Centruroides edwardsii
Registro en:
T 0701 274
CD3666
Autor
Cupitra Vergara, Nelson Iv?n
Institución
Resumen
65 P?ginas Recurso Electr?nico El veneno de escorpi?n ha despertado la curiosidad del mundo cient?fico principalmente sobre los g?neros Centruroides, Isometrus, Ananteris y Tityus de la familia Buthidae, los cuales albergan algunas especies consideradas como un factor de riesgo para la salud humana en pa?ses tropicales (escorpionismo). En Colombia uno de los causantes de este tipo de accidentes por su picadura es Centruroides edwardsii, un escorpi?n disperso a lo largo del valle del rio magdalena, y de cuyo veneno se ha reportado actividad sobre el sistema nervioso y circulatorio, adem?s de ser reportado como el responsable del 24 % de estos accidentes, solo en los departamentos de Antioquia y Tolima; igualmente se debe resaltar la falta de informaci?n sobre la composici?n y los mecanismos de acci?n de las toxinas que contiene su ponzo?a, limitando asi la comprensi?n de su bioactividad en la busqueda de compuestos bioactivos de importancia farmac?utica. En esta investigaci?n se evalu? el potencial biol?gico del veneno de 35 escorpiones identificados como Centruroides edwardsii, los cuales fueron capturados en la vereda rinc?n de chipalo del municipio de Alvarado y mantenidos en cautiverio, al tiempo que se les llevo a cabo la extracci?n de su veneno por estimulaci?n el?ctrica. Se realiz? la caracterizaci?n pept?dica del veneno a trav?s de R-HPLC y PAGE-SDS, encontrando en su mayor?a p?ptidos de bajo peso molecular (+/- 10 kDa); Se evalu? el efecto antibacteriano, proteol?tico, y fosfol?tico del veneno crudo, de los cuales no se hallaron resultados estad?sticamente significativos, a excepci?n de la prueba de hemolisis indirecta, la cual posiblemente se dio por la acci?n de fosfolipasas A2 dependientes de Ca+. El resultado global indica que son las fosfolipasas A2 uno de los componentes encargados de actividad biol?gica en el veneno, posiblemente relacionadas con el da?o neurot?xico tanto en la caza de su alimento, como el accidente escorpi?nico. ABSTRACT. The scorpion venom has aroused the curiosity of the scientific world mainly on gender Centruroides, Isometrus, and Tityus Ananteris the Buthidae family, which house some species considered as a risk factor for human health in tropical countries (scorpionism). In Colombia one of the causes of such accidents by their sting is Centruroides edwardsii, a scattered along the valley of the Magdalena River scorpion, whose venom and has been reported on the nervous and circulatory system, as well as being reported as responsible for 24% of these accidents, only in the departments of Antioquia and Tolima; also highlighted a lack of information on the composition and the mechanisms of action of toxins contained their venom, thus limiting the understanding of their bioactivity in the search for bioactive compounds of pharmaceutical importance. in this research the biological potential of venom 35 scorpions identified as Centruroides edwardsii, which were captured in the corner sidewalk Chipalo the municipality of Alvarado and kept in captivity, was assessed while I were conducted extracting venom by electrical stimulation. venom peptide characterization was performed using R-HPLC and SDS-PAGE, the peptides found in most low molecular weight (10 kDa +/-); Antibacterial, proteolytic, and crude venom fosfol?tico effect, which was evaluated no statistically significant results were found, except for the indirect hemolysis, which may be given by the action of phospholipase A2 dependent Ca +. The overall result indicates that phospholipase A2 is one of the components responsible for biological activity in the venom, possibly related to nerve damage in both hunting their food, as the scorpion accident. INTRODUCCI?N 13
1. JUSTIFICACI?N 15
2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 17
3. OBJETIVOS 18
3.1. OBJETIVOS GENERALES 18
3.2. OBJETIVOS ESPEC?FICOS 18
4. METODOLOG?A 19
4.1. ?REA DE TRABAJO 19
4.2. COLECTA 19
4.3. DETERMINACION TAXON?MICA 20
4.4. EXTRACCI?N DE VENENO 21
4.5. CARACTERIZACI?N DEL VENENO 21
4.5.1. Cromatograf?a l?quida de alta eficacia (HPLC) 21
4.5.2. Electroforesis en gel de poliacrilamida 22
4.6. EVALUACION DEL POTENCIAL BIOL?GICO 23
4.6.1. Actividad fosfolipasa 23
4.6.2. Actividad proteol?tica 23
4.6.3. Actividad hemol?tica directa e indirecta 23
4.6.4.Actividad antimicrobiana 23
4.6.5. An?lisis estad?stico 24
5. MARCO TE?RICO 25
5.1. LOS ESCORPIONES (ALACRANES) 25
5.2. VENENO 26
5.3. CARACTERIZACI?N PROTEICA 28
5.3.1. Cromatograf?a 28
5.3.2. Electroforesis en gel de poliacrilamida 29
5.4. ACTIVIDAD BIOL?GICA 29
5.4.1. Actividad fofolipasa A2 29
5.4.2. Actividad proteasa 30
5.4.3. Actividad antibacteriana 31
5.4.4. P?ptidos antibasterianos 32
5.5. P?PTIDOS NEUROT?XICOS 33
5.6. ANTECEDENTES 34
6. RESULTADOS Y DISCUSI?N 37
6.1. COLECTA Y DETERMINACI?N TAXON?MICA 37
6.2. CARACTERIZACI?N DEL VENENO 41
6.3. ACTIVIDAD DEL POTENCIAL BIOL?GICO 42
7. CONCLUSIONES 51
RECOMENDACIONES 52
REFERENCIAS 53