The health area is constantly exploring new options for infection control, with natural products being a great alternative. Chitosan and propolis are currently widely used in dentistry, with favorable results. Hence, it was proposed to determine, through an explanatory investigation with an experimental laboratory design, the antibacterial effect of a chitosan and propolis membrane on pathogens of dental interest. The preliminary antibacterial activity of 45% propolis dye (TP45%) on Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis and Pseudomonas aeruginosa was determined using the modified agar diffusion technique with wells, subsequently the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by macrodilution in tubes. and the chitosan/propolis membranes were prepared, which were evaluated by the agar diffusion method in triplicate, using 0.12% chlorhexidine gluconate as a control. S. aureus was more susceptible than E. faecalis, no inhibitory effect on P. aeruginosa was observed. The MIC for S. aureus was 16 ug/mL while for E. faecalis it was 128 ug/mL. TP45% showed activity against Gram positive bacteria, however, the effect was not preserved in chitosan/propolis membranes.El área de la salud se mantiene en una continua exploración de nuevas opciones para el control de infección siendo los productos naturales una gran alternativa. Actualmente el quitosano y propóleo son ampliamente utilizados en Odontología, con resultados favorables. De allí que se planteó determinar mediante una investigación explicativa con diseño experimental de laboratorio, el efecto antibacteriano de una membrana de quitosano y propóleo sobre patógenos de interés odontológico. Se determinó la actividad antibacteriana preliminar de tintura propóleo al 45% (TP45%) sobre Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis y Pseudomonas aeruginosa utilizando la técnica de difusión en agar modificada con pozos, posteriormente se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) mediante macrodilución en tubos y se elaboraron las membranas de quitosano/propóleo, las cuales se evaluaron a través del método de difusión en agar por triplicado, utilizando como control gluconato de clorhexidina al 0,12%. S. aureus fue más susceptible que E. faecalis, no se observó efecto inhibitorio sobre P. aeruginosa. La CIM para S. aureus fue 16 ug/mL mientras que para E. faecalis fue 128 ug/mL. TP45% mostró actividad frente las bacterias Gram positivas, sin embargo, el efecto no se conservó en las membranas de quitosano/propóleo.