Tesis Doctorado
Identificación de genes de expresión diferencial en cáncer pancreático mediante hibridación sustractiva por supresión/microarray y su evaluación como potenciales biómarcadores
Autor
Espinoza-Ruiz, Jaime Andrés
Institución
Resumen
El adenocarcinoma ductal pancreático (ADP) representa el decimotercercáncer más frecuente a nivel mundial y es la causa de muerte de alrededor de260,000 personas cada año. Esta enfermedad es más común en la tercera edad y solo alrededor del 20% de los pacientes presentan tumores localizados ypotencialmente curables mediante la extracción quirúrgica del órgano. La tasa de sobrevivencia en pacientes a los 5 años es menor al 5%, lo que convierte al ADP en uno de los tumores sólidos más mortales. El pésimo pronóstico del ADP está directamente vinculado a la falta de metodologías de diagnóstico temprano y detratamientos antineoplásicos efectivos. La sobrevida de los pacientes mejorasustancialmente si el tumor es diagnosticado en etapas tempranas de laenfermedad. Recientemente se demostró que la progresión del ADP, desde lageneración de la célula tumoral de origen hasta la aparición del primer clanmetastásico, ocurre en un tiempo promedio de 15 años, permitiendo una hipotéticaventana de tiempo para el diagnóstico temprano de la enfermedad. En estecontexto, es de importancia identificar biomarcadores moleculares que permitandetectar la lesión tumoral y cuya implementación pueda ser transferible al uso clínico rutinario. En este estudio empleamos la metodología de hibridaciónsustractiva por supresión (SSH, de su sigla en inglés) acoplada a microarray para estudiar el transcriptoma de baja abundancia de tumores de adenocarcinomaductal pancreático, con el objetivo de identificar moléculas que se expresendiferencialmente con respecto de tejidos no neoplásicos y que posean especificidad por el tejido tumoral. La estrategia SSH permite enriquecer diferentes genes a los identificados mediante la estrategia directa (microarray convencional),permitiendo una reducción de genes de alta abundancia relacionados con matrixextracelular y favoreciendo la identificación de genes de funciónpredominantemente intracelular. Por otra parte, la estrategia SSH enriqueciógenes relacionados con la vía de señalización de Wnt asociada a ?-catenin.Identificamos incremento de los niveles del transcrito y la proteína de los genesWNT9A y PLEKHM1 en tejidos de ADP. La proteína WNT9A se expresa a bajosniveles en las células ductales de tejidos pancreáticos no neoplásicos, sinembargo, mayores niveles de expresión se observaron en tejidos tumorales deADP. La proteína codificada por el gen PLEKHM1 se expresa de forma exclusivaen células tumorales y no en otros tipos celulares del páncreas. Ambas proteínasse expresan de forma diferencial y presentan gran especificidad por el tejido tumoral. En conclusión, con esta investigación hemos identificado nuevospotenciales biomarcadores de cáncer pancreático a partir del transcriptoma debaja abundancia del ADP, analizado mediante hibridación sustractiva porsupresión. Nuevos marcadores de alta especificidad pueden contribuir adesarrollar nuevas metodologías de diagnóstico molecular para el cáncerpancreático. PFCHA-Becas Doctor en Ciencias Mención Biología Celular y Molecular Aplicada 284p. PFCHA-Becas TERMINADA