Stilbenoids and proanthocyanidins in grape canes: Characterization, incidence of post-pruning storage conditions, antioxidant and antiproliferative in cancer cell lines activity.
Estilbenoides y proantocianidinas en sarmientos de vides: Caracterización, incidencia de las condiciones de guarda post-poda, actividad antioxidante y antiproliferativa en células cancerosas.;
Stilbenoids and proanthocyanidins in grape canes: characterizatión, incidence of post-pruning storage conditións, antióxidant and antiproliferative in cancer cell lines activity.;
Estilbenoides y proantocianidinas en sarmientos de vides: caracterización, incidencia de las condiciónes de guarda post-poda, actividad antióxidante y antiproliferativa en células cancerosas.
| dc.contributor | von Baer von Lochow, Dietrich | |
| dc.contributor | UNIVERSIDAD DE CONCEPCION | |
| dc.creator | Sáez Pulgar, Vania Stephanie | |
| dc.date | 2018-05-07T15:21:48Z | |
| dc.date | 2022-08-19T00:16:51Z | |
| dc.date | 2018-05-07T15:21:48Z | |
| dc.date | 2022-08-19T00:16:51Z | |
| dc.date | 2018 | |
| dc.date.accessioned | 2023-08-22T01:22:23Z | |
| dc.date.available | 2023-08-22T01:22:23Z | |
| dc.identifier | 21130603 | |
| dc.identifier | https://hdl.handle.net/10533/210995 | |
| dc.identifier.uri | https://repositorioslatinoamericanos.uchile.cl/handle/2250/8305500 | |
| dc.description | Grape canes are lignocellulosic residue produced in the seasonal winter pruning in vineyards. They are proposed as a potential source of stilbenoids because their high levels of (E)-resveratrol. Due the lack of commercial standards, oligomeric stilbenoids were purified from grapes canes by CPC and semi-preparative HPLC from Pinot Noir pilot scale extract. Twelve stilbenoids were isolated: (E)-ε-viniferin, (E)-resveratrol, (E)-piceatannol, ampelopsin A, vitisin B, (E)-δ-viniferin, (E)-ω-viniferin, pallidol, scirpusina A, isorhapontigen, (E)-trans-cismiyabenol C and a new oligostilbenoid, iso-scirpusin A. The identities were confirmed by HPLC-Q-ToF and 1H- NMR, 13C-NMR, 1H-HCOSY, 1H-13C-HSQC experiments. Isolated oligostilbenoids shows a higher antioxidant capacity then (E)-resveratrol by ORAC-Fl in vitro assay. (E)-piceatannol has an antiproliferative activity in human cancer cell lines tested (SK-MES-1, AGS, J82) by MTT in vitro assay, but do not have appreciable effect in human normal cell line (MRC-5). Ampelopsin A has higher antiproliferative effect then (E)-resveratrol in human bladder cancer cell lines (J82). In grape canes the increment of inducible stilbenoids are influenced by the pruning. Surprisingly, the enhanced level in metabolic active grape canes depends of the post-pruning storage conditions. A HPLC-DAD-FL-MS/MS for identification and HPLC-DAD-FL rapid method for selective quantification using core-shell technology was development for stilbenoids as well as procyanidins, a (poly)phenolic family associated to healthy effects, in three different cultivars of grape canes under two different post-pruning conditions of relative humidity (RH). The oligostilbenoids levels in grape canes were twice in 60% RH than 70 % RH. Procyanidins, mainly (-)-epicatechin decreased their levels at 75% in grape canes with post-pruning storage. To develop a strategy for maximizing the levels of inducible stilbenoids is necessary to consider the relative humidity and not only the length of the cut of grape cane, the temperature and the storage time period following the pruning. A Comprehensive bidimensional chromatography (HILIC x RP)-DAD-MS/MS method was development for grape canes with a high peak capacity (842) and orthogonally (A0 = 78%). Was possible separate 81 compounds, among then highly polymerized stilbenoids as well as prodelphidins and oligomeric procyanidins, some of them reported for first time in grape canes. | |
| dc.description | Los sarmientos de vides son residuos lignocelulósico que se producen anualmente en los viñedos durante la poda invernal. Debido a los altos niveles de (E)-resveratrol, se han propuesto a los sarmientos como una fuente de estilbenoides. Debido a la carencia de estándares de estilbenoides oligoméricos, éstos se purificaron a través de CPC y HPLCsemi-preparativa desde un extracto de sarmientos de Pinot Noir, obteniéndose 12 estilbenoides: (E)-ε-viniferina, (E)-resveratrol, (E)-piceatanol, ampelopsin A, vitisina B, (E)-δ-viniferina, (E)-ω-viniferina, pallidol, scirpusina A, isorapontigenina, (E)-trans-cismiyabenol C y un nuevo estilbenoide, denominado iso-scirpusina A. La identidad de los oligoestilbenoides se confirmó a través de HPLC-Q-Tof y mediante 1H- NMR, 13C-NMR, 1H-HCOSY, 1H-13C-HSQC. Los oligoestilbenoides aislados presentaron una mayor capacidad antioxidante in vitro a través de ORAC-FL que (E)-resveratrol. (E)-piceatannol exhibe efecto in vitro antiproliferativo a través del ensayo MTT sobre líneas celulares cancerosas humanas (SK-MES-1, AGS, J82), este efecto no es apreciable sobre la línea celular humana normal (MRC-5). Ampelopsina A muestra un efecto antiproliferativo mayor que (E)-resveratrol en la línea celular J82 de cáncer de vejiga. Sorprendentemente, el incremento de los estilbenoides en sarmientos es gatillado por la poda. La magnitud de dicho incremento en el sarmiento metabólicamente activo depende de las condiciones en la guarda post-poda. Para evaluar la evolución de los estilbenoides así como de las procianidinas, una familia de (poli)fenoles asociados con efectos beneficiosos para la salud, se desarrolló y aplicó en tres cultivares de vides un método HPLC-DAD-FL para la cuantificación rápida, selectiva y sensible, empleando tecnología de columna de núcleo sólido y un método HPLC-DAD-FL-MS/MS para la identificación. A 60 % de humedad relativa, se obtiene el doble de (E)-resveratrol para el mismo cultivar en comparación a los sarmientos que se almacenaron en 70 % de humedad relativa. (-) epicatequina disminuye sus niveles durante el almacenamiento post-poda hasta un 75%. Por lo que la humedad relativa es una variable importante a considerar en el almacenamiento post-poda de los sarmientos, además del tiempo de guarda, temperatura y longitud del trozo de sarmiento. Explorando nuevas opciones con mayor poder de separación, se desarrolló y optimizó un método cromatográfico bidimensional (HILIC x RP)-DAD-MS/MS, obteniéndose con una buena separación, capacidad de peak (842) y ortogonalidad (A0 = 78%). Se separaron 81 compuestos, entre los que destacan estilbenoides altamente polimerizados así como prodelfinidinas y procianidinas oligoméricas reportadas por primera vez en sarmientos de vides. | |
| dc.format | application/pdf | |
| dc.relation | instname: Conicyt | |
| dc.relation | reponame: Repositorio Digital RI2.0 | |
| dc.relation | info:eu-repo/grantAgreement//21130603 | |
| dc.relation | info:eu-repo/semantics/dataset/hdl.handle.net/10533/93488 | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
| dc.subject | Ciencias Naturales | |
| dc.subject | Ciencias Químicas | |
| dc.subject | Química Analítica | |
| dc.title | Stilbenoids and proanthocyanidins in grape canes: Characterization, incidence of post-pruning storage conditions, antioxidant and antiproliferative in cancer cell lines activity. | |
| dc.title | Estilbenoides y proantocianidinas en sarmientos de vides: Caracterización, incidencia de las condiciones de guarda post-poda, actividad antioxidante y antiproliferativa en células cancerosas. | |
| dc.title | Stilbenoids and proanthocyanidins in grape canes: characterizatión, incidence of post-pruning storage conditións, antióxidant and antiproliferative in cancer cell lines activity. | |
| dc.title | Estilbenoides y proantocianidinas en sarmientos de vides: caracterización, incidencia de las condiciónes de guarda post-poda, actividad antióxidante y antiproliferativa en células cancerosas. | |
| dc.type | Tesis Doctorado | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | |
| dc.type | Tesis |