Tesis Doctorado
Caracterización de plantas deficientes en el complejo ii mitocondrial en arabidopsis thaliana
Autor
Fuentes-Flores, Daniela Andrea
Institución
Resumen
El complejo II mitocondrial (succinato deshidrogenasa [SDH]) participa tanto en el
ciclo de Krebs como en la cadena transportadora de electrones. Cataliza la oxidación de
succinato a fumarato y la reducción de ubiquinona a ubiquinol. Está formada por 4
subunidades, una flavoproteína {SDHl) y una proteína hierro-azufre {SDH2) periféricas, y
dos proteínas integrales de membrana {SDH3 y SDH4).
La flavoproteína está codificada por 2 genes nucleares SDH1-1 y SDH1-2. Trabajos
previos del laboratorio mostraron que SDH1-2 es dispensable y que SDH1-1 es esencial
para el desarrollo de los gametos en Arabidopsis tha/iana. En esta tesis se caracterizaron
plantas heterocigotas mutantes SDH1-1/sdh1-1 que presentan una modesta reducción en
la actividad SDH, y líneas que presentan un silenciamiento post-transcripcional parcial
mediante RNA interferencia. Estas plantas presentaron un aumento en el crecimiento del
tejido aéreo y un aumento en la tasa fotosintética en comparación con las plantas
silvestres. Además, mostraron un aumento en la conductancia estomática, fenómeno que
se debe a que las plantas mutantes y silenciadas presentaron un aumento en la apertura
y densidad estomáticas. Por otro lado, no se observaron diferencias significativas en la
respiración en oscuridad, transferencia electrónica del cloroplasto, y la captación de C02 a
concentraciones saturantes de C02. Esto indica que el aumento en la fotosíntesis en las
plantas deficientes en SDH está asociado a un efecto específico en las células estomáticas,
que generaría un aumento en la captación de C02 por medio de los estomas.
Estudios de metabolómica en semillas y flores de plantas mutantes en SDH,
mostraron que los cambios metabólicos observados se deben principalmente a un efecto
del metabolismo en los distintos tejidos del desarrollo analizados, más que por efecto de
la mutación en SDH. Por otro lado, estudios de metabolómica y transcriptoma en hojas de
plantas mutantes SDH1-1/sdh1-1 mostraron cambios a nivel del metabolismo y pocos
cambios a nivel de la expresión génica. Sin embargo, se observó una disminución de un
grupo importante de aminoácidos. Los datos sugieren que la disminución observada en
los niveles de aminoácidos está dada por un alto flujo hacia la síntesis de proteínas y
otros compuestos nitrogenados para poder sostener el aumento en el crecimiento de la
planta.
Finalmente, de manera interesante plántulas mutantes SDH1-1/sdh1-1 crecieron
mejor en condiciones limitantes de nitrógeno y además incorporaron más nitrato que las
plantas controles. En su conjunto estos datos indican que una modesta alteración
metabólica puede generar cambios en importantes funciones que regulan el crecimiento
de las plantas tales como el movimiento estomático y asimilación del nitrógeno para así
poder mantener un balance entre el metabolismo del carbono y nitrógeno. PFCHA-Becas Doctorado en Ciencias Biológicas Mención Genética Molecular y Microbiología 161p. PFCHA-Becas TERMINADA