Tesis Doctorado
Señalización en preacondiciónamiento isquémico tardío en un modelo de isquemia-reperfusión hepática en la rata
Autor
Romanque-Ulloa, Pamela del Rosario
Institución
Resumen
El daño por Isquemia-Reperfusión (IR) es un fenómeno de acentuación del
daño celular en un órgano isquémico después del reestablecimiento del flujo
sanguíneo. En el hígado va asociado a la cirugía que se realiza bajo exclusión
vascular, al trasplante del árgano y a estados de shock o trauma con compromiso
multisistémico. La isquemia induce un estado proinflamatorio que aumenta la
vulnerabilidad del tejido durante la reperfusión. Cursa en dos fases: temprana y
tardía, que se asocian a la activación de las células de Kupffer y a la llegada,
infiltración y activación de linfocitos polimorfonucleares, respectivamente. La
exposición a un período breve de isquemia previo a un período de isquemia más
prolongado, resulta en protección tisular; fenómeno que se conoce como
preacondicionamiento isquémico (Pl). El Pl otorga dos ventanas de protección:
temprana y retardada. La fase protectora retardada o segunda ventana de
protección (SVP) del Pl no se ha descrito en el hígado. Los objetivos de este
estudio fueron: (i) desarrollar un modelo de IR hepática parcial en la rata, (u)
determinar la existencia de la SVP del PI en el hígado, (iii) evaluar el efecto del
pretratamiento con antioxidantes sobre el Pl y (iv) comprobar la aparición de
respuestas protectoras dependientes del factor de transcripción redox sensible
NF-KB inducidas por el Pl. Se realizó Pl a ratas Sprague Dawley machos, para lo
cual se las sometió a un período de 10 minutos de isquemia 72 horas antes de la
isquemia prolongada (60 minutos). El Pl fue precedido una hora antes de una
dosis de NAC o su vehículo. Se obtuvieron muestras de sangre y tejido durante la reperfusión de O a 72 horas para los animales de los grupos que caracterizaron el
modelo de daño por IR y a las 3 y/o 20 horas de reperfusión post isquemia
prolongada, para los animales sometidos a Pl+lR.
El modelo de daño por IR con 60 minutos de isquemia hepática parcial en la
rata, que se describe en este estudio, presenta dos fases: temprana y tardía, que
coinciden en los marcadores enzimáticos e histológicos de daño. El factor de
transcripción NF-KB tiene un comportamiento bifásico durante el período postreperfusión
de O a 72 horas que sigue a 60 minutos de isquemia. Se comprobó la
existencia de la SVP en el hígado y ésta se caracteriza por: (i) una disminución de
la actividad sérica de AST, ALT y LDH, y (u) una disminución en el estrés
oxidativo tisular hepático. Durante la SVP se encontró disminución de los niveles
séricos de citoquinas proinflamatorias y activación temprana de NF-KB, además de
modulación de la respuesta de fase aguda y disminución de la expresión del
mARN de ¡NOS. El pretratamiento con antioxidante no modifica la protección
mediada por el Pl.
Se concluye la existencia de la SVP en el hígado, ventana que se
desarrollaría al menos después de 48 horas del estímulo preacondicionante. La
protección desencadenada por el PI tardío no dependería de la generación de
ROS durante la isquemia breve o preacondicionante y cursaría con disminución de
la respuesta inflamatoria y modulación de la respuesta de fase aguda, entre otros
efectores. PFCHA-Becas Doctor en Ciencias Biomédicas 142p. PFCHA-Becas TERMINADA