The uncontrolled release of acid mine drainage (AMD) characterized by elevated concentrations of dissolved metals, high levels of sulfate ions and low pH values threatens the quality of water resources nearby mining areas worldwide. The development of novel technologies based on the precipitation of metals as metal sulfides catalyzed by sulfate reducing bacteria constitute an important method for the bioremediation ofAMD. The objective ofthis study was to evaluate in batch experiments the efficiency of different organic substrates such as acetate, lactate, ethanol and peptone as electron donors during the generation of biogenic sulfide by different microbial inocula and its possible applications in the bioremediation of AMD. The highest sulfide production activity was obtained with 2.5 g acetate-COD L-1 as substrate, 4000 mg SO4-2 L−1 as electron acceptor and the sediments of an artificial lagoon as bacterial inoculum. The final cumulative sulfide production was 463 mg S2- L-1, the maximum specific sulfide production activity was 9 mg S2- g acetate-1 d-1, and the maximum specific sulfate reduction activity was 52 mg SO4-2 g acetate-1 d-1. In terms of the substrate concentration, a 10-fold increase in the concentration of the electron donor resulted in substrate inhibition significantly decreasing the biogenic sulfide activities. The results of this study indicate that acetate was a highly effective substrate during the microbial sulfate reduction with a potential application in the remediation of acid mine drainage. Moreover, the use of acetate as electron donor favored the sulfate reducing activity through the inhibition ofthe methanogenic activity ofthe microorganisms present in the evaluated microbial inocula.La descarga no controlada de los drenajes ácidos de mina (DAM) caracterizados por presentar elevadas concentraciones de metales disueltos, iones sulfato y pH ácido amenaza la calidad de los cuerpos de agua cercanos a las zonas mineras alrededor del mundo. Tecnologías basadas en la precipitación de metales en forma de sulfuros metálicos, catalizada por las bacterias sulfato reductoras encargadas de la producción desasimilatoria de sulfuros constituyen un importante método de remediación de los DAM. En este trabajo de investigación se evaluó la eficiencia de diferentes sustratos tales como acetato, lactato, etanol y peptona como donadores de electrones durante la sulfato reducción microbiana. Diferentes inóculos microbianos y sus posibles aplicaciones en el tratamiento biológico de los DAM fueron estudiados en experimentos batch. La mayor eficiencia de producción de sulfuro catalizada por las bacterias sulfato reductoras fue alcanzada empleando 2.5 g DQO-acetato L-1 como donador de electrones, 4000 mg SO42− L−1 como aceptor de electrones y los sedimentos de una laguna artificial como inóculo bacteriano. La producción final acumulada de sulfuro fue 463 mg S2- L-1, mientras que la actividad máxima específica de producción de sulfuro fue 9 mg S2- g acetato-1 d-1 y la actividad máxima específica de reducción de sulfato fue 52 mg SO42− g acetato−1 d−1. El efecto de la concentración de sustrato también fue evaluado, un incremento de 10X en la concentración del donador de electrones resultó en una inhibición por sustrato disminuyendo significativamente la actividad biogénica de generación de sulfuro. Los resultados de este estudio indican que acetato fue un sustrato muy eficiente durante la sulfato reducción microbiana con un gran potencial de aplicación en la remediación de los DAM. Más aún, el empleo de acetato como donador de electrones favoreció la actividad sulfato reductora a través de la inhibición de la actividad metanogénica de los microorganismos presentes en los inóculos microbianos evaluados.