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Aplicación de Pancreatina en modelo de lesión medular experimental como medio de regeneración neuronal
Autor
Chávez Asmat, Roberto Jesús
Resumen
-- Objective: To determine the degradation of glial scar and the presence of neuronal
regeneration in rabbits with experimental spinal cord injury who received application of
pancreatin. Design: Experimental. Institution: Faculty of Medicine-San Marcos, Small
Animal Clinic-San Marcos University, Institute of Pharmaceutical Sciences and Natural
Resources "Juan de Dios Guevara", National Institute of Neurological Sciences, Centre
for Magnetic Resonance-DIPSAC, Lima. Biological materials: New Zealand rabbits (n
= 12) Methods: We divided into two phases, first with a biochemical method for the
determination of glial scar degradation effect by pancreatin and the second with an in
vivo method, which reproduces the model Hashimoto spinal cord injury after two
months, made the formation of 2 groups at random, an enzyme group (receiving 5 mg of
pancreatin in 100 µL 0.1 M phosphate buffer pH 6.7 intrathecally) and a control group (
received 100 µL 0.1 M phosphate buffer pH 6.7 intrathecally) both for a period of 21
days. The experimental animals were evaluated before, after injury and during the
administration of the enzyme with the clinical trials BBB (Basso, Beattie and
Bresnahan), Tarlov, open-field activity, inclined plane and cylinder. Scores were
compared in clinical trials as well as histopathological findings through non-parametric
Wilcoxon and Mann-Whitney test. For the study was considered a confidence level of
95%. Results: Clinical evaluations performed at regular intervals on days 0, 7, 14 and
21 for the application of pancreatin (enzyme group) and phosphate buffer (control
group) showed no statistically significant difference between groups. Was obtained in
the enzyme group lower cavity area expressed in mm2 and percentage with respect to
control this being a significant difference (p = 0.008 and p = 0.042 respectively). There
was obtained between the enzyme and control group a significant difference in
connective tissue content, the presence of astrocytes and myelinated area (p = 0.222, p =
0.421 and p = 1,000 respectively). In the control group does not appear axonogenesis or
very little in comparison of the enzyme group that has more dimensions of
axonogenesis and even evidence of amputation neuromas. Conclusion: The pancreatin
applied in experimental spinal cord injury promotes the reduction of intramedullary
cavities and axonogenesis type neuronal regeneration.
-- Keywords: Spinal cord injury, experimental model, neuronal regeneration and
pancreatin Objetivo: Determinar la degradación de cicatriz glial y presencia de regeneración neuronal en conejos con lesión medular experimental que recibieron aplicación de pancreatina. Diseño: Experimental. Institución: Facultad de Medicina-UNMSM; Clínica de animales menores-UNMSM; Instituto de Ciencias Farmacéuticas y Recursos Naturales “Juan de Dios Guevara”; Instituto Nacional De Ciencias Neurológicas; Centro de resonancia magnética-DIPSAC, Lima. Materiales biológicos: Conejos Nueva Zelandia (n=12) Métodos: Investigación dividida en dos fases, las primera con un método bioquímico para determinación de acción degradativa de cicatriz glial por pancreatina y la segunda con un método in vivo, donde se reproduce el modelo de lesión medular de Hashimoto, luego de dos meses se procede a la conformación de 2 grupos de manera aleatoria, un grupo enzima (recibe 5mg de pancreatina en 100 µL tampón fosfato 0,1M y pH 6,7 vía intratecal) y un grupo control (recibe 100 µL tampón fosfato 0,1M y pH 6,7 vía intratecal) ambos por un periodo de 21 días. Los animales de experimentación fueron evaluados antes, después de la lesión y durante la administración de la enzima con la pruebas clínicas BBB (Basso, Beattie y Bresnahan), de TARLOV, de campo abierto, de plano inclinado y del cilindro. Se compararon los puntajes obtenidos en las pruebas clínicas así como los resultados histopatológicos a través del test no paramétrico Wilcoxon y Mann – Whitney. Se consideró para el estudio un nivel de confiabilidad de 95%. Resultados: Las evaluaciones clínicas realizadas de manera periódica en los días 0, 7, 14 y 21 de aplicación de pancreatina (grupo enzima) y tampón fosfato (grupo control), no demostraron diferencia estadísticamente significativa entre los grupos. Se obtuvo en el grupo enzima una menor área de cavidades expresada en mm2 y porcentaje con respecto al control siendo esta una diferencia significativa (p=0.008 y p=0.042 respectivamente). No se obtuvo entre el grupo enzima y control una diferencia significativa en el contenido de tejido conectivo, la presencia de astrocitos y área mielinizada (p=0.222, p=0.421 y p=1.000 respectivamente). En el grupo control no se presenta axonogénesis o es muy escasa a comparación del grupo enzima que presenta mayores dimensiones de axonogénesis e incluso con evidencia de neuromas de amputación. Conclusión: La pancreatina aplicada en la lesión medular experimental promueve la disminución de cavidades intramedulares y la regeneración neuronal del tipo axonogénesis.
-- Palabras clave: Lesión medular, modelo experimental, regeneración neuronal y pancreatina. Tesis