La cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (CG-EM) es la herramienta más empleada y poderosa para el análisis de lípidos, por exactitud, sensibilidad y reproducibilidad. Se estandarizó la técnica de cromatografía acoplada a espectrometría de masas usando los modos de ionización por impacto electrónico (IE) y por ionización química (IQ) para el análisis de metilesteres de ácidos grasos calculando los parámetros estadísticos necesarios para esto, como lo son la precisión, linealidad, limite de detección y limite de cuantificación, sensibilidad y limite de linealidad;logrando valores aceptables de estas medidas, indicando que la técnica muestra concordancia entre análisis. Como muestra real se utilizó el aceite de crisálida de gusano de seda Bombix mori hibrido pilamo 1 procedente del corregimiento de Santa Rosa en el municipio de Buga en el Valle del Cauca, el cual fue analizado después des que la técnica estuvo estandarizada y que el aceite fue derivatizado, obteniendo como ácidos mayoritarios al ácido palmitico y el ácido oleico con 26,300% y 43,752% respectivamente.