Las microalgas se caracterizan por tener una alta tasa de división, además de una adecuada composición bioquímica (proteínas, lípidos y carbohidratos) por lo que son utilizadas como alimento vivo para moluscos bivalvos, en la etapa larval de crustáceos y algunos peces y para enriquecer zooplancton. En este trabajo se realizó un cultivo semicontinuo (15L) de las microalgas Phaeodactylum tricornutum y Thalassiosira weissflogii, con el objetivo de evaluar el efecto de las tasas de dilución del 20, 30 y 40% sobre la producción de biomasa (densidad celular) y la composición bioquímica (proteínas, lípidos, carbohidratos y clorofila a) de estas microalgas. En P. tricornutum y T. weissflogii, las mayores densidades celulares se obtuvieron en los tratamientos del 20 y 30%. No se encontraron diferencias en la concentración de proteínas y clorofila a, en las tres tasas de dilución del sistema semicontinuo de P. tricornutum. Mientras que, para T. weissflogii, el mayor contenido de lípidos y carbohidratos se obtuvo en la tasa de dilución del 20%. En conclusión, la tasa de dilución del 20% es la más viable económicamente ya que mostró resultados similares a la tasa de dilución del 30 y superiores a la del 40% para la producción de biomasa en ambas especies de microalgas.The microalgae are characterized by a high division rate, further a good biochemical composition (protein, lipids, and carbohydrates). Therefore, they are used as feed for the larval stage of bivalve mollusks, crustaceans, and some fish. Also, microalgae are used to enrich zooplankton. In this investigation, a semicontinuous culture (15L) of the microalgae P. tricornutum and T. weissflogii was carried out to evaluate the effect of 20, 30 and 40% dilution rates on biomass production (cell density) and biochemical composition (proteins, lipids, carbohydrates, and chlorophyll a). For P. tricornutum and T. weissflogii, the highest cell densities were obtained in the 20 and 30% (p>0.05). There were no significant differences in proteins, and chlorophyll a (p>0.01) in the three dilution rates of the semicontinuous system of P. tricornutum. While, for T. weissflogii, the highest lipid and carbohydrate content was obtained in the 20 % (p<0.05) dilution rate. In conclusion, the 20% dilution rates is the most economically since it showed results similar to the dilution rate of 30% and higher than that of 40% for biomass production in both microalga species.