Tesis
Análise dos efeitos do egf e do fgf2 sobre a diferenciação das células da crista neural truncal de codornas, in vitro
Autor
Teixeira, Bianca Luise
Institución
Resumen
TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Biológicas. Biologia. A crista neural (CN) é uma população de células originadas das margens dorsais do
tubo neural durante o desenvolvimento de vertebrados. Essas células possuem um
alto potencial migratório e dão origem a múltiplos fenótipos como neurônios, células
gliais, melanócitos e a diversos derivados mesenquimais. Sabe-se que essa
diversificação de fenótipos é espacialmente e temporalmente influenciada por
fatores do microambiente. Vários fatores de crescimento, incluindo o Fator de
Crescimento de Fibroblasto-2 (FGF2) e o Fator de Crescimento Epidermal (EGF),
têm sido identificados como sendo capazes de direcionar a diferenciação de
progenitores multipotentes da CN para tipos celulares específicos. Nesse trabalho
avaliamos o papel do FGF2 e do EGF na diferenciação dos progenitores da CN
truncal (CNT) de aves, analisando a expressão dos fenótipos celulares: neurônios,
células gliais, melanócitos e células musculares lisas. Para isso culturas de células
da CNT foram tratadas com FGF2 (20ng/mL) e/ou EGF (10ng/mL). Os tratamentos
foram realizados em dois períodos diferentes, durante as primeiras 24h da fase de
migração das células da CNT (cultura primária), ou durante as primeiras 24h de
cultura secundária (fase de diferenciação), após 15h de migração em cultura
primária. As culturas secundárias foram mantidas por mais 6 dias quando as células
foram fixadas e analisadas quanto à expressão dos diferentes fenótipos celulares.
Os resultados demonstram que o tratamento com FGF2 nas primeiras 24h de cultura
primária promoveu um aumento de 3x no número de células gliais em relação ao
controle sem tratamento. Já o tratamento com EGF nesse mesmo período aumentou
em 2x a proporção de neurônios e melanócitos em relação ao controle. O tratamento
concomitante com FGF2 e EGF promoveu um aumento no número de neurônios,
sendo que o número de melanócitos e células gliais não foi alterado. O tratamento
das células da CNT com ambos os fatores de crescimento, no período de
diferenciação, não promoveu alterações significativas na expressão dos fenótipos
celulares analisados em relação ao controle. Estes resultados sugerem um efeito
importante do FGF2 na diferenciação das células da CNT para o fenótipo glial e do
EGF para neurônios e melanócitos. Desta forma, hipotetizamos uma possível ação
competitiva desses fatores no progenitor indiferenciado bipotente glia-melanócito, e
uma atuação do EGF também em um progenitor não responsivo ao FGF2, envolvido
com diferenciação neurogênica . Os resultados sugerem ainda que ambos os fatores
de crescimento são fundamentais nas primeiras 15h de migração para a
determinação e/ou especificação dos progenitores multipotentes da CN