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Inmunohistochemical identification of angiotensin II antigen receptors in umbilical artery of alpaca (Vicugna pacos)
Identificación inmunohistoquímica de antígenos receptores de angiotensina II en arteria umbilical de alpaca (Vicugna pacos)
Registro en:
10.15381/rivep.v30i4.17194
Autor
Ayala C., Emanuel
Sato S., Alberto
Sandoval C., Nieves
Navarrete Z., Miluska
Institución
Resumen
The aim of this study was to identify the angiotensin II receptor antigens in the umbilical artery of the alpaca (Vicugna pacos). Six gravid uteri of alpacas from community farms located at 4000 m above the sea level in Cusco, Peru were used. The gestation time was estimated by the biparietal diameter of the foetus. Histological sections of 5 µm thickness were obtained from each umbilical artery. The Avidin-Biotin-peroxidase immunohistochemistry (IHQ) technique was applied, using IHQ reagents and polyclonal anti-Angiotensin II antibodies. The slides were analysed with a Leica DM750 binocular microscope with digital camera attached and LAS 4.7 Leica Macrosystems software. The intensity of marking was classified qualitatively (0: negative; 1: weak; 2: moderate; 3: strong labelling). For the positive control, ovine umbilical artery samples were used. The angiotensin II receptor antigens were in the smooth muscle cells of the umbilical arteries in the various gestation times. The antigens showed a strong labelling intensity, showing that angiotensin exerts its biological activity of vasoconstriction in the smooth muscle cells of the blood vessel. El objetivo de este trabajo fue identificar los antígenos receptores de angiotensina II en la arteria umbilical de la alpaca (Vicugna pacos). Se trabajó con seis úteros grávidos de alpacas procedentes de comunidades alpaqueras a 4000 msnm en Cusco, Perú, cuyo tiempo de gestación fue estimado por el diámetro biparietal del feto. Se obtuvieron cortes histológicos de 5 µm de espesor de cada arteria umbilical. Se aplicó la técnica de inmunohistoquímica (IHQ) Avidina-Biotina-peroxidasa, utilizando reactivos de IHQ y anticuerpos policlonales anti-Angiotensina II. Las láminas fueron analizadas con microscopio binocular Leica DM750 con cámara digital anexada y software LAS 4.7 Leica Macrosystems. La intensidad de marcación se clasificó de manera cualitativa (0: sin marcación; 1: marcación leve; 2: marcación moderada; 3: marcación fuerte). Para el control positivo se empleó muestras de arteria umbilical ovina. Los antígenos receptores de angiotensina II se localizaron en las células musculares lisas de las arterias umbilicales en los tiempos de gestación evaluados. Los antígenos presentaron una intensidad de marcación fuerte, lo que demuestra que la angiotensina ejerce su actividad biológica de vasoconstricción en las células musculares lisas del vaso sanguíneo.