Semen from alpacas was collected by two methods: by aspiration from the female’s vagina following mating and with an artificial vagina. Semen was collected, evaluated and extended with Tris buffer, and then used in artificial insemination. Altogether 160 female alpacas with proven reproductive history and five males were used. Semen was collected by vaginal aspiration from 10 females using five males as semen donors; likewise, semen from the same males was collected with an artificial vagina twice a week 50 times. Volume, motility, spermatic concentration, live spermatozoa, viscosity and color was evaluated. Seminal characteristics of semen collected by aspiration and with an artificial vagina were: volume (3.6 and 1.5 mL), motility (73.4 and 69.0%), sperm concentration (75.2 and 80.3 million/mL), live spermatozoa (75.3 and 70.8%) respectively, with statistical difference between methods (p<0.05). Semen was mainly light red (80%) and showed a semi viscous consistency (90%) in semen collected by aspiration, and milky white (60%) and viscous (90%) from artificial vagina. Pregnancy diagnosis by ultrasonography 30 days after insemination was 55% (55/100) when using semen by aspiration and 48% (24/ 50) when using semen from artificial vagina (p<0.01). Semen collection from the vagina following mating yielded greater volume, better quality, and semi viscous consistency, and the percentage of pregnancy was higher than semen from artificial vagina.Semen de alpaca fue colectado por dos métodos: por aspiración de la vagina de la hembra después de la monta natural y con vagina artificial. El semen colectado fue evaluado y diluido con Tris tamponado, y luego usado en inseminacion artificial. Se trabajó con 160 alpacas hembras adultas de capacidad reproductiva comprobada y 5 alpacas machos. Se colectó semen post cópula de los cinco machos en 10 hembras, y se hicieron 50 colecciones de semen con vagina artificial de estos machos, dos veces por semana. Se determinó volumen, motilidad, concentración espermática, porcentaje de espermatozoides vivos, viscosidad y color. Los resultados para semen colectado por aspiración de la vagina y con vaginal artificial fueron: volumen (3.6 y 1.5 mL), motilidad (73.4 y 69.0%), concentración espermática (75.2 y 80.3 millones/mL), espermatozoides vivos (75.3 y 70.8%), respectivamente, con diferencia entre métodos (p<0.05). El color fue mayormente rojo claro (80%) y la consistencia seminal semiviscosa (90%) en el semen colectado de la vagina natural, y blanco lechoso (60%) y viscoso (90%) en semen colectado por vagina artificial. El diagnóstico de gestación por ecografía a los 30 días de la inseminación indicó una tasa de preñez de 55% (55/100) con semen colectado por aspiración vaginal y de 48% (24/50) con semen de la vagina artificial (p<0.01). Se concluye que con la colección de semen por aspiración se logra mayor volumen, mejor calidad y menor viscosidad del semen y mayor porcentaje de preñez que usando semen colectado con vagina artificial.