Tesis de Maestría
“CARACTERIZACIÓN FUNCIONAL DE UN GEN DE TERPENO SINTASA INVOLUCRADO EN LA SÍNTESIS DE METABOLITOS SECUNDARIOS EN Lippia graveolens (ORÉGANO MEXICANO)”
Fecha
2019-05-27Autor
Loeza Román, René Isaías
Institución
Resumen
Lippia graveolens (Orégano mexicano) es una planta aromática, sus hojas son un
condimento ideal para gran número de platillos. El orégano mexicano se ha empleado
en la medicina tradicional por varias culturas para aliviar una gran cantidad de
problemas (digestivos, pulmonales, renales, nerviosos e infecciosos), además sus
aceites esenciales se utilizan actualmente en la industria de jabones, perfumes y
cosméticos principalmente. La mayoría de sus propiedades se deben a la alta
composición de terpenos en su aceite esencial. Los terpenos son los compuestos más
abundantes y diversos en la naturaleza, en las plantas cumplen diversos roles como
atrayentes de polinizadores y defensa contra estrés biótico y abiótico. Los terpenos son
sintetizados por una familia de enzimas llamadas terpeno sintasas, estas enzimas han
sido ampliamente estudiadas en muchas especies vegetales por el gran número de
enzimas por planta y la gran diversidad de compuestos que generan. Debido a la falta
de información sobre la síntesis de terpenos en L. graveolens, el propósito de este
estudio fue la obtención de un gen terpeno sintasa y su análisis, por lo que se procedió
a la búsqueda de genes terpeno sintasa en el transcriptoma de L. graveolens, también
se buscó la amplificación por PCR de fragmentos de ADNc empleando primers
degenerados diseñados de regiones conservadas. A partir de las secuencias parciales
TPS obtenidas en el transcriptoma de hoja y amplificados por PCR, se diseñaron
primers para la obtención de un gen completo TPS, el gen obtenido fue clonado, su
secuencia y la predicción de su estructura terciaria mostraron amplia similitud con
genes terpeno sintasa, se encontraron los motivos funcionales caracteristicos de las
enzimas terpeno sintasa (RRx8W y DDxxD), un análisis filogenético permitió clasificarla
como parte de la familia TPSb (monoterpeno/isopreno sintasa) en el árbol elaborado
por Chen et al., (2011) y el análisis de expresión de dos fragmentos de genes parciales
TPS (5V y 7V) por PCR tiempo real mostró su mayor expresión en hoja y en tallo en
comparación con la raíz.