Evaluación de la expresión de a-Gal en tejidos de cerdo a diferentes edades

Abstract

RESUMEN:

La falta de donadores de órganos ha llevado a explorar otras fuentes de tejidos y órganos y el cerdo por su parecido anatómico con el humano, facilidad de crianza y reproducción es un candidato adecuado, sin embargo y a pesar de estas ventajas, los cerdos expresan el epítopo α-Gal, que es una molécula involucrada en el rechazo inmunológico de trasplantes. Debido a la expresión de esta molécula no es factible realizar xenotrasplantes de tejidos u órganos de cerdo. Sin embargo, existen técnicas en ingeniería de tejidos a través de las que se pueden obtener constructos acelulares derivados del tejido de cerdo, que al implantarse reparan tejidos en menor tiempo y con mayor funcionalidad respecto a heridas sin tratamiento. El reto en estos constructos tisulares es disminuir al máximo la expresión de α-Gal. En el presente trabajo se evaluó la edad del cerdo como un factor en la expresión del epítopo α-Gal, así, el objetivo fue caracterizar y cuantificar la molécula α-Gal en tejidos de interés clínico para los trasplantes provenientes de cerdos de diferentes edades. Cortes de tejidos de músculo esquelético y cardiaco, aorta, piel, pulmón, ojo, intestino y riñón de cerdos (n=3) de 7, 14, 21, 28, 35 y 42 días se procesaron con la técnica de inmunohistoquímica para evidenciar la expresión del epítopo α-Gal utilizando el anticuerpo M86. La expresión se evaluó por medio de un analizador de imágenes (Image Pro-Plus 7.0). Los resultados mostraron que el epítopo α-Gal se localizó en el endotelio de capilares sanguíneos, con la notable excepción de los capilares del glomérulo renal. Células basales de la epidermis y del urotelio resultaron positivas. Las paredes alveolares y la zona apical del epitelio del bronquiolo fueron positivas. En el riñón el túbulo contorneado proximal fue positivo, no así el túbulo contorneado distal. Cabe destacar que estructuras como la córnea y el cartílago hialino de pulmón no fueron positivos a ninguna edad. De cada tejido se realizó un análisis de imagen (n=6 para ojo, intestino y riñón y n=10 para el resto de los órganos) para obtener el área y la intensidad de marca asociada a la expresión de α-Gale. Así, se demostró por primera vez y de forma cuantitativa que α-Gal está relacionado con la edad. Fue evidente que los órganos de cerdos de 7 días de edad expresan significativamente menos α-Gal que los órganos de cerdos de 42 días edad. Con base en los resultados, se puede concluir que los tejidos de cerdo analizados expresan una menor cantidad de α-Gal conforme la edad del cerdo disminuye por lo que el obtener tejidos y órganos de cerdos de menor edad pueden ser una alternativa adecuada para la generación de constructos acelulares. Tejidos como la córnea y cartílago son negativos en las edades analizadas por lo que en el trasplante α-Gal no sería un factor de rechazo.