Expresión del factor ehhstf3 en trofozoitos de entamoeba histolytica bajo condiciones de choque térmico

Abstract

RESUMEN: La amibiasis es una parasitosis que tiene un impacto importante, precisamente debido a que la severidad de la enfermedad puede tornarse de una infección asintomática a una ulcerativa y mortal, por lo que es considerada mundialmente la tercera parasitosis más importante, y a nivel nacional un problema de salud pública, ya que México es considerado una zona endémica. Entamoeba histolytica es un parásito que durante su ciclo de vida está expuesto a diferentes ambientes por lo que requiere de una regulación génica muy importante para sobrevivir. Recientemente identificamos siete posibles factores de transcripción de choque térmico denominados: EhHSTF1, EhHSTF2, EhHSTF3, EhHSTF4, EhHSTF5, EhHSTF6 y EhHSTF7. En el presente trabajo realizamos la detección física del EhHSTF3 y analizamos su expresión en relación con el choque térmico en trofozoítos de E. histolytica, Los resultados mostraron que el anticuerpo anti-EhHSTF3 reconoce dos proteínas en los EC, de 25 y 54 kDa, cuya intensidad en general se incrementó en los extractos de los trofozoítos expuestos al estrés térmico. Mientras que en los EN, particularmente en los de los trofozoítos expuestos a 42°C se detectaron con mayor intensidad tres bandas de 25, 54 y 80 kDa las cuales pudieran corresponder a la forma monomérica, dimérica y trimérica de este factor respectivamente, que solo se forma cuando las células son expuestas a un estrés térmico. Asímismo cuando se estudió la localización subcelular del EhHSTF3 observamos que en los trofozoítos sin estrés térmico, la proteína se localiza de forma difusa en el citoplasma. Mientras que en los trofozoítos expuestos 30 min al choque térmico muestran una redistribución del factor localizándose en focis en la periferia del núcleo.

ABSTRACT: Amebiasis is a parasitic disease which has an important impact, precisely because the severity of the disease may become an asymptomatic infection, ulcerative and deadly, by what is considered the third most important parasitic diseases globally, and at the national level a public health problem, since Mexico is considered an endemic area. Entamoeba histolytica is a parasite that is exposed to different environments and it requires a very important survival gene regulation during its life cycle. Recently, we identified seven potential so-called heat shock transcription factors: EhHSTF1, EhHSTF2, EhHSTF3, EhHSTF4, EhHSTF5, EhHSTF6 and EhHSTF7. In the present work we carry out the physical detection of the EhHSTF3 and analyze its expression in relation to thermal shock on trophozoites of E. histolytica, the results showed that the antibody anti-EhHSTF3 recognizes two proteins in the EC of 25 and 54 kDa, whose intensity is in general increased in extracts of the trophozoites exposed to heat stress. While in the trophozoites exposed to 42 °C were detected with higher intensity three bands of 25, 54 and 80 kDa which could correspond to the monomer, dimeric and trimeric forms of this factor respectively, which interestingly, only formed when cells are exposed to heat stress. Moreover, the sub-cellular localization of the EhHSTF3 in the trophozoites without heat stress was diffuse in the cytoplasm. While in the trophozoites exposed 30 min to heat shock show a redistribution of the factor located in focis on the periphery of the nucleus.