Tesis
Caracterización funcional, farmacológica y bioquímica del transportador de dopamina en corazón de cobayo
Fecha
20/06/2012Registro en:
Reynoso Palomar, Alejandro Rodolfo. (2010). Caracterización funcional, farmacológica y bioquímica del transportador de dopamina en corazón de cobayo. (Doctorado en Ciencias Quimicobiológicas). Instituto Politécnico Nacional, Sección de Estudios de Posgrado e Investigación, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, México.
Autor
Reynoso Palomar, Alejandro Rodolfo
Institución
Resumen
RESUMEN: La neurotransmisión dopaminérgica (NT-DA) ha sido involucrada en la regulación periférica de la neurotransmisión noradrenérgica (NT-NA) y colinérgica (NT-C). Aunque existen evidencias experimentales de la presencia de la NT-DA en el corazón aún no es aceptada su existencia en el mismo. El presente trabajo pretende establecer la presencia, funcionalidad y ubicación del transportador de dopamina (TDA) como un elemento más que sustente la existencia de la neurotransmisión dopaminérgica en el corazón y compararlo con los transportadores de noradrenalina (TNA) y de colina (TC) ampliamente estudiados en el mismo órgano. Realizando estudios funcionales empleando agonistas de la NT-DA; (±)-7-OH-DPAT agonista dopaminérgico D3; de la NT-NA, la L-noradrenalina, y de NT-C, la acetilcolina; así como con los inhibidores de los transportadores de cada neurotransmisor. El inhibidor del TDA, el maleato de nomifensina; el inhibidor del TNA, la nisoxetina y finalmente el inhibidor del TC, el hemicolinio-3 y vesamicol, a diferentes concentraciones (10-9 a 10-5 M), evaluando los efectos de los fármacos en las variables de frecuencia cardiaca y dP/dt max, en corazón íntegro y de frecuencia de disparo en aurícula derecha aislada, ambos de cobayo. A través de estudios de autorradiografía usando radioligandos selectivos para el TDA, el ([3H] WIN-35428) y para el TNA ([3H]nisoxetina) se determinó la presencia y la distribución del TDA en las cámaras cardíacas, analizándolo en forma comparativa con la distribución del TNA. Estos estudios se complementaron con ensayos bioquímicos de Western blot empleando anticuerpos policlonales y monoclonales específicos para cada uno de los transportadores mencionados en los tejidos cardíacos. Los resultados obtenidos en corazón íntegro fueron: con la perfusión de agonistas, cronotrópico e inotrópico positivos con la noradrenalina, y un efecto cronotrópico e inotrópico negativo con el (±)-7-OH-DPAT y la acetilcolina. El uso de inhibidores de los transportadores, indujo efectos similares al agonista del neurotransmisor correspondiente, excepto por la nisoxetina; con la que el efecto fue dual; cronotrópico positivo a concentración nM y cronotrópico e inotrópico negativo a concentración M. Los resultados relacionados con la frecuencia de disparo de la aurícula derecha fueron muy similares a los observados en el corazón íntegro, sin embargo, el efecto cronotrópico negativo de la nomifensina fue discretamente mayor, sugiriendo una mayor distribución del transportador de DA en tejido auricular; por otro lado, el efecto cronotrópico negativo de la nisoxetina fue menor, sugiriendo una mayor distribución ventricular del transportador de noradrenalina. Con los protocolos de Western blot todas las cavidades cardiacas expresan a los tres transportadores con diferentes concentraciones y distribución y con pesos moleculares concordantes con lo reportado en la literatura. En los estudios de autorradiografía, mientras que el transportador de NA tienen una distribución más homogénea en las cuatro cavidades, el transportador de DA se distribuye en forma heterogénea y con mayor concentración en la aurícula derecha. Los resultados de este proyecto demuestran la expresión del TDA en los tejidos cardiacos y nos ayudan a sustentar con mayores evidencias la existencia de la NT-DA en el corazón con importantes implicaciones funcionales en relación a su probable participación en la regulación de la neurotransmisión noradrenérgica y colinérgica en el mismo órgano.