Diseño de un péptido sintético capaz de bloquear la infección por hsv-1 y hsv-2 in vitro

Abstract

ABSTRACT: Herpes Simplex viruses are neurotropic viruses that can produce a wide range of clynical syndromes in humans. Complications associated with these viruses like encephalitis, neonatal infections and the onset of AIDS in HIV positive patients due to the replication of HSV-2 are a huge public health problem. The arising of HSV-1 and HSV-2 strains resistant to the antivirals commonly used makes the development of new antivirals an urgent task. The aim of this work was to design a novel antiviral therapy to inhibit the entry of HSV-1 and HSV-2 into their host cells.A search for the most exposed and flexible regions of the glycoprotein H of HSV-1 was performed by in silico hydrophobicity, antigenicity and chain flexibility determinations. Secondary structure predictions and alignments were carried out to find regions in the gH of both HSV-1 and HSV-2 with conserved secondary structure. Three peptides derived from the gH of HSV-1 were synthetized (CB-1, CB-2 and TNT) and tested for their cytotoxicity in HepG2/C3A and Vero cell lines showing toxicity levels under 20%.Concentrations ranging from 12.5 M to 0.3 M were able to inhibit the infection with 100 TCID50/ml of both HSV-1 and HSV-2 with an efficiency between 80-100%. Concentrations ranging from 0.8 M to 0.01 M were efficient (more than 100%) against 50 TCID50/ml of HSV-1 and HSV-2. The efficiency of the three peptides tested is comparable to the efficiency of the antiherpetic compound Acyclovir, this opens the possibility of using

RESUMEN: Los virus del Herpes Simplex son virus neurotrópicos que producen diferentes síndromes clínicos en el humano. Las reactivaciones de estos virus y las complicaciones asociadas a ellas (encefalitis, infecciones neonatales, relación con HIV-1), así como la aparición de cepas de HSV-1 y HSV-2 resistentes a los antivirales que se emplean en la actualidad, hace indispensable el desarrollo de nuevas terapias específicas y eficaces en contra de las infecciones herpéticas. En este trabajo se planteó el desarrollo de una nueva terapia en contra de las infecciones herpéticas mediante el empleo de péptidos sintéticos. Se analizaron la hidrofobicidad, antigenicidad y flexibilidad de cadena de la gH de HSV-1 para buscar las regiones expuestas y flexibles de dicha glicoproteína. También se determinó la estructura secundaria de la gH de HSV-1 y HSV-2 para localizar aquellas regiones con estructura altamente conservada entre ambas glicoproteínas. Se diseñaron tres péptidos derivados de la glicoproteína H de HSV-1. Los péptidos sintéticos (CB-1, CB-2 y PAT) no mostraron niveles de toxicidad superiores al 20% en las líneas celulares HepG2/C3A y Vero y fueron capaces de bloquear la infección por HSV-1 y HSV-2 in vitro. Las concentraciones óptimas para la actividad de los péptidos van de 12.5 M a 0.3 M contra 100 TCID50/ml y de 0.8 M a 0.01 M contra 50 TCID50/ml. La eficiencia de los tres péptidos es comparable con la del compuesto antiviral Aciclovir. Dado que los blancos virales sobre los que actúan esos antivirales son distintos podrían utilizarse en terapia combinada reduciendo los efectos adversos del Aciclovir así como la selección de cepas resistentes.