Determinación del efecto cicatrizante del extracto acuoetanolico de la planta Bacopa Procumbens en la línea celular 3t3 de fibroblastos de ratón

Abstract

RESUMEN: La cicatrización es el proceso por el cual se lleva a cabo la reparación de heridas dando cómo resultado final la formación de un tejido cicatrizal; incluye tres fases (Inflamatoria, proliferativa y de reparación) las cuales se presentan en una forma secuencial, abarcando periodos de tiempo específico; además tienen elementos celulares y agentes extracelulares que las caracterizan. Los fibroblastos son una de las principales células que participan en este evento ya que son los responsables de generar el tejido de granulación, liberar factores de crecimiento, de la formación de fibras de colágena y del cierre de las lesiones a través de la diferenciación que sufren a miofibroblastos, los cuales expresan característicamente la proteína contráctil ?-SMA. Existen una serie de factores que afectan este proceso como la isquemia, hipoxia, infecciones yS ste u a se e de acto es que a ecta este p oceso co o a sque a, po a, ecc o es y anormalidades metabólicas. Debido a ello hay una serie de medicamentos y terapias alternativas como el uso de plantas que han demostrado tener muchas de ellas empíricamente un efecto cicatrizante, antiséptico y antinflamatorio. Tal es el caso de la planta Bacopa procumbens (Mill.) Greenm (Escrafulariaceae) conocida como “metatera”, en la que Molina en el 2007 menciona que es utilizada para la cicatrización de heridas en el Estado de Hidalgo. Sin embargo, no se tiene un conocimiento científico que avale esta propiedad, por lo que fue de interés evaluar el efecto cicatrizante del extracto acuoetanólico de la planta B procumbens (Mill )fue de interés evaluar el efecto cicatrizante del extracto acuoetanólico de la planta B. procumbens (Mill.) Greenm en procesos involucrados en la reparación de heridas en una línea celular 3T3 de fibroblastos de ratón. Para ello se colectó la planta y elaboró el extracto acuoetanólico, mediante la técnica de reflujo. Este extracto se fraccionó con hexano, cloroformo y agua. Así mismo, se realizó un análisis fitoquímico preliminar en el que se detectó la presencia de saponinas, flavonoides, quinonas y triterpenos. El efecto de cada fracción se evaluó mediante ensayos de proliferación con MTT. Los resultados demostraron que tanto el extracto acuoetanólico, como la fracción hexánica, clorofórmica y principalmente la acuosa incrementaron la proliferación de los fibroblastos desde dosis bajas de 1 ?g/ml, tal es el caso de la fracción acuosa que incrementó la proliferación en un 62.5% con una dosis de 1 ?g/ml; en tanto que el mayor efecto (90% más que el control) se presentó con la dosis de 200 ?g/ml a las 48 h, dicho efecto fue de manera dosis dependiente. El incremento en la proliferación celular se corroboró con el análisis de la expresión de la proteína PCNA, en donde la mayor expresión se obtuvo a las 48 h en las células tratadas con 50 ?g/ml de extracto. Así mismo, la fracción acuosa tuvo un efecto adhesivo importante sobre la unión de los fibroblastos a fibronectina, ya que con dosis de 1 ?g/ml y tiempos cortos de 30 min se presentó la mayor adhesión a esta proteína, la cual fue de 110% más que el control. Por otro lado, en cuanto a la migración de los fibroblastos de observó un ligero efecto cuando se utilizaron dosis bajas de 1 a 50 ?g/ml a las 48 h de incubación. En tanto que la expresión de ?-SMA, fue mayor en las células tratadas con el extracto a las 24 y 48 h comparado con el control de 24 h Finalmente este primer estudio sobre el efecto en la cicatrización de Bcomparado con el control de 24 h. Finalmente, este primer estudio sobre el efecto en la cicatrización de B. procumbens (Mill.) Greenm dan las primeras evidencias de que el extracto acuoso contiene algún o algunos metabolitos que estimulan a los fibroblastos 3T3 de ratón en las primeras fases de la cicatrización como son la proliferación, la adhesión a fibronectina y la migración, eventos importantes en la reparación de herida.