Liofilización de la cepa de bordetella pertussis factores determinantes de la calidad para su presentación en viales y ampollas

Abstract

En liofilización, lo más difícil es mantener la vida; y el objetivo es obtener un producto seco, con un contenido de humedad aceptable y una actividad biológica u organoléptica lo más cercana posible a la natural, conteniendo la integridad total de moléculas termolábiles y, además, a la vida misma de células en tejidos, bacterias y virus.

Esto se logra con un proceso de liofilización basado en la optimización, condiciones de trabajo que permiten lograr el objetivo en menos tiempo y al menor costo.

El desarrollo de la liofilización de la cepa bacteriana de Bordetella Pertussis, que provoca síndrome conocido como COQUELUCHE – TOSFERINA Ó TOS CONVULSA, es materia prima en la producción de Vacuna Pertussis Concentrada (producto al granel) y principio activo para la formulación de la Vacuna Triple ó D.P.T. (Difteria-Pertussis-Tétanos).

En el Instituto Nacional de Higiene “Leopoldo Izquieta Pérez” de Guayaquil se produce la liofilización de Bordetella Pertussis en AMPOLLAS de 5 ml, cumpliendo las especificaciones de calidad requeridas tanto del envase como del producto liofilizado.

Como aplicación, a este tema de tesis, se realizó el cambio de presentación de la cepa, de ampollas a VIALES de 1 ml, conociendo los resultados de los lotes liofilizados en ampollas con los parámetros de calidad y límites de aceptación.

Se liofilizaron 4 lotes en la presentación de Viales, cada lote de 26 viales.

Se introdujo el uso de gradillas que servían de base a los viales.

Tres lotes se ensayaron con el Medio de Leche Descremada al 10%, y el lote Nº 4 se liofilizó con la Cepa 143 Bordetella Pertussis.

De los ensayos realizados se observó que en el lote en que se trabajó con base metálica estable se obtuvo un mejor porcentaje de viales con buen vacío, en comparación con los 2 lotes en que se utilizó otro tipo de base.

Así tenemos: Lote 1 (con base espumaflex): 53.84 % viales con vacío Lote 2 (con base metálica inestable): 84.60 % viales con vacío Lote 3(con base metálica estable): 96.15 % viales con vacío

Quedando establecida la aplicación de la gradilla metálica con base estable, y con ella se realizó el proceso de liofilización de la Cepa Bordetella Pertussis, obteniendo así en el lote Nº 4 un rendimiento de 100% de viales liofilizados con buen vacío, de excelente calidad, eficiencia antigénica y seguridad al igual que las que se obtiene en la presentación en ampollas.

La importancia de este cambio de presentación, a VIALES, está representado en la disminución en el porcentaje de pérdidas por rompimiento de los mismos y en la mínima probabilidad de contaminación del vial liofilizado al iniciar el flujo de producción de la vacuna con la reconstitución de la cepa.

En consecuencia, su coste-producto supera las expectativas de aceptación y ahorro comparado con la presentación anterior.

The most difficult part in freeze-drying is to keep life; and the main objective is to obtain a dry product, with an acceptable wetness contain and the closest possible to natural biological or organoleptic activity, containing the total integrity of the termolabiles molecule and the life itself of the tissues, germs, viruses.

In order to get this, it is used a freeze-drying process based is optimization, work conditions that allows to obtain the objective in the fewest time with the cheapest cost.

The development of the Bordetella Pertussis germ stock freeze-drying, provokes the syndrome known as Pertussis, also known as Whooping Couch, is raw material in the production of the Pertussis vaccine and active principle for the formulation of the Triple D.P.T. (Diphtheria, Pertussis, Tetanus).

In the Hygiene National Institute “Leopoldo Izquieta Peréz” -Guayaquil, it is produced the Bordetella Pertussis freeze-drying in 5 ml blister accomplishing the quality specifications required as much as for the container as for the freeze dried product.

As an application for this thesis topic, It was carried out a change of presentation of the strain’s container, of ampoules to 1ml vials, knowing all quality results and acceptance limits of the lots contained in ampoules that had been freezed dried before.

Four lots were freezed dried in vials, each lot of 26 vials.

The griddles use was introduced that served from base to vials.

Tree lots were used as tests with a 10% descremada milk media, and lot 4 Bortedella Pertussis strain 143 was freeze dried.

It was observed that lot worked with stable metallic base it was gotten a better vials percentage with vacuum, in comparison with the 2 lots in which another base type was used.

In this way we have:

Lot 1 (with foamy base): 53.84% vials with vacuum Lot 2 (with unstable metallic base) 84.60% vials with vacuum Lot 3 ( stable metallic base): 96.15% vials with vacuum

It have left established metallic griddle with stable base to freeze dryer Bortedella Pertussis strain, in this way it was obtained 100% of vials with vacuum with excellent quality, antigenic efficiency and security the same as that one obtains in the presentation in ampoules.

The importance of this presentation change to vials, it is represented in decrease in percentage off losses for break of the same ones and minimum probability of contamination of vial dried when beginning the flow off vaccine production.

In consequence its cost-product exceeds the acceptation expectative and the economy comparing with the previous presentation.